人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达时易形成不溶性无活性的包涵体增加了胰岛素的生产成本以蛋白作为端标签时可提高融合蛋白的可溶性若让大肠杆菌表达出带有蛋白标签的人胰岛素原融合蛋白再经蛋白酶酶切即得到可溶性人胰岛素原为降低胰岛素生产成本提供基础如图为构建重组质粒的基本流程为氨苄青霉素抗性基因为四环素抗性基因几种限制酶的酶切位点已在图中标注人胰岛素原基因中不含这几种限制

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153107. （2024•高新一中•高二下期末）人胰岛素原（insulin）基因在大肠杆菌中表达时易形成不溶性、无活性的包涵体，增加了胰岛素的生产成本。以NusA蛋白作为N端标签时可提高融合蛋白的可溶性。若让大肠杆菌表达出带有NusA蛋白标签的人胰岛素原融合蛋白（His-NusA-insulin），再经蛋白酶酶切，即得到可溶性人胰岛素原，为降低胰岛素生产成本提供基础。如图为构建重组质粒（pHis-NusA-insulin）的基本流程，Amp^r为氨苄青霉素抗性基因，Tet^r为四环素抗性基因，几种限制酶的酶切位点已在图中标注。人胰岛素原基因中不含这几种限制酶的识别序列，实验所用大肠杆菌对氨苄青霉素和四环素均敏感。回答下列问题：
$德优题库$
（1）经过程①即PCR技术可大量扩增人胰岛素原基因，该技术的原理是        。
（2）构建重组载体1需用        酶分别处理载体1和人胰岛素原基因，这种做法的优点是        。将重组载体1导入经        处理后的大肠杆菌，为便于筛选，该大肠杆菌培养基中应添加        。
（3）重组载体1和2在构成表达调控元件上的区别在于前者        。含有重组载体2的大肠杆菌，在含有四环素的培养基中        （填“能”或“不能”）生存并大量增殖。
（4）若要从个体水平鉴定合成的胰岛素是否具有生物活性，则实验组的操作是        。

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[考点]

基因工程的操作过程综合，

[答案]

（1）DNA半保留复制
（2）EcoRⅠ、HindⅢ；可确保目的基因与载体的正确连接；Ca²⁺；氨苄青霉素
（3）不含启动子和终止子；能
（4）给实验动物静脉注射合成的胰岛素，并监测其血糖变化

[解析]

解：（1）PCR 技术的原理是DNA半保留复制。
（2）据图可知，重组载体1是将PCR获得的目的基因插入经EcoRⅠ、HindⅢ切割的载体1中获得，且启动子在EcoRⅠ切口端，所以构建重组载体1时需用EcoRⅠ、HindⅢ酶分别处理载体1和人胰岛素原基因，同时用两种限制酶切割的优点是可确保目的基因与载体的正确连接。导入重组载体前可先用Ca²⁺处理大肠杆菌，使其处于易于吸收周围环境中DNA分子的状态。重组载体1中含有氨苄青霉素抗性基因Amp^r，所以为便于筛选，该大肠杆菌培养基中应添加氨苄青霉素。
（3）据图可知，重组载体1和2在构成表达调控元件上的区别在于前者不含启动子和终止子。若欲获得重组载体2，则载体2的B区域应具有EcoRⅠ和HindⅢ的识别序列。含有重组载体2的大肠杆菌，能在含有四环素的培养基中生存并大量增殖。
（4）若要从个体水平鉴定合成的胰岛素是否具有生物活性，则实验组的操作可以是给实验动物静脉注射合成的胰岛素，并监测其血糖变化。
故答案为：
（1）DNA半保留复制
（2）EcoRⅠ、HindⅢ；可确保目的基因与载体的正确连接；Ca²⁺；氨苄青霉素
（3）不含启动子和终止子；能
（4）给实验动物静脉注射合成的胰岛素，并监测其血糖变化

[点评]

本题考查了"基因工程的操作过程综合，"，属于"常考题"，熟悉题型是解题的关键。

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相似题 全部同步专题复习模拟真题联考专练月考周考期中期末单元寒假暑假副题

152827. （2024•师大附中•高二上期末）某种转基因油菜的产油率明显高于普通油菜，原因是转入的基因A的表达产物可抑制油菜细胞内糖类和蛋白质的合成，促进丙酮酸大量转化为油脂。如图为科研人员培育产油率高的转基因油菜的主要过程示意图。请回答下列问题：
$德优题库$
（1）获取基因A后可利用        技术对其进行扩增，一个基因A通过该技术进行n次循环，一共需要消耗        对引物。
（2）我国科学家独创的将目的基因导入植物细胞的方法为        。图中将目的基因导入植物细胞的方法为农杆菌转化法，转化是指        。
（3）过程①中，通常将基因A插入到Ti质粒T-DNA中的        之间，以利于基因A的表达。过程④中，需要添加的具有启动细胞分裂、再分化作用的关键激素为        。经图示过程获得的油菜是否为产油率高的转基因油菜，还需要对其进行        的鉴定，该种鉴定方法属于个体生物学水平的鉴定，只有符合要求并通过安全性测试的转基因油菜才能推广并种植。

共享时间:2024-02-09 难度:1 相似度:2

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152828. （2024•师大附中•高二上期末）对微生物或动植物的细胞进行基因改造使他们能够生产药物，是目前基因工程在医药卫生领域的应用。如图表示pBR322质粒和人生长激素基因所在片段的结构信息，将二者构建的重组质粒导入大肠杆菌并进行筛选，最终生产出重组人生长激素。回答下列问题：
$德优题库$
（1）构建重组质粒时应选择的限制酶组合为        ，原因是        ，被切割后的质粒电泳后，可得到        个条带。
（2）使用        可连接目的基因和质粒片段，此过程形成        个磷酸二酯键（只考虑两个DNA片段的连接）。
（3）人生长激素基因在受体菌中是否表达，可检测受体菌中是否含有        （填“人生长激素基因”或“人生长激素基因RNA”或“人生长激素前体物”）；此时的产物        （填“有”或“没有”）生物活性，原因是        。

共享时间:2024-02-09 难度:1 相似度:2

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157657. （2022•关山中学•高二下三月）某实验室从马铃薯体内分离出某种酶的编码基因StNCED1，构建了马铃薯块茎特异表达启动子CIPP启动的StNCED1表达载体，最终获得休眠期延长的转基因马铃薯，其实验流程如图所示。请回答下列问题：
$德优题库$
（1）以块茎RNA为起点获取并扩增StNCED1基因的技术称为RT-PCR技术，该过程中需要加入的酶是        ，需要加入的原料是        。
（2）上述实验流程中核心操作的目的是        。
（3）CIPP等启动子的作用是        。
（4）为检测目的基因是否转人马铃薯细胞的染色体DNA上，可采用        技术，以        为探针进行杂交。除该水平之外，还可在        水平上进行鉴定。

共享时间:2022-07-23 难度:1 相似度:2

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156052. （2023•铁一中学•高二下期中）真核生物基因中通常有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。已知在人体中基因A（有内含子）可以表达出某种特定蛋白（简称蛋白A）。回答下列问题：
（1）某同学从人的基因组文库中获得了基因A，以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A，其原因是        。
（2）若用家蚕作为表达基因A的载体，在噬菌体和昆虫病毒两种载体中，不选用        作为载体，其原因是        。
（3）若要高效地获得蛋白A，可选用大肠杆菌作为受体。因为与家蚕相比，大肠杆菌具有        （答出两点即可）等优点。
（4）若要检测基因A是否翻译出蛋白A，可用的检测物质是        （填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”）。
（5）艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献，也可以说是基因工程的先导，如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示，那么，这一启示是        。

共享时间:2023-05-15 难度:1 相似度:2

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155727. （2024•西安市蓝田县城关中学•高二下期中）为使水稻获得抗除草剂性状，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入水稻植株，获得抗草甘膦转基因水稻。
$德优题库$
（1）将草甘膦抗性基因作为       ，与Ti质粒用相同的       和DNA连接酶处理构建基因表达载体。
（2）用       处理农杆菌后获得感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在添加       的培养基中，经筛选1得到含基因表达载体的农杆菌。
（3）利用PCR技术，可以鉴定被侵染的愈伤组织中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下：
5'---ATGGCT………AGGAAC---3'
3'---TACCGA………TCCTTG---5'
根据上述序列应选择引物       （填字母）进行PCR。
A．引物：5'-TACCGA-3'
B．引物：5'-GTTCCT-3'
C．引物：5'-AUGGCU-3'
D．引物：5'-ATGGCT-3'
（4）PCR扩增时需要根据草甘膦抗性基因序列设计       种引物，其原因是       。
（5）除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否       。两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过细胞的       过程，获得转基因水稻。

共享时间:2024-05-15 难度:1 相似度:2

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155249. （2024•西安一中•高三下期中）胆囊收缩素（CCK）是一种能反复作用于大脑皮层海马体诱导其神经元活性的神经递质，胆囊收缩素受体2（CCKR-2）主要表达于大脑的边缘系统，能介导CCK诱导的焦虑相关症状。tTA基因表达的蛋白tTA可以结合到目的基因的启动子上，促进基因的表达。为研究CCK诱导的焦虑症发病机制，研究人员制备了前脑特异性tTA-CCKR-2双转基因小鼠（dtg）模型，主要步骤如下：
（1）第一步：构建转tTA基因鼠和转CCKR-2基因鼠，流程如图所示。图中过程甲是        ；若只考虑导入一个目的基因到染色体上，则T中tTA基因纯合子所占的比例是        ，F₁中含CCKR-2基因的小鼠中纯合子所占的比例是        。
$德优题库$
（2）第二步：构建tTA-CCKR-2双转基因小鼠（dtg）模型。将上述获得的纯合子鼠杂交获得12只小鼠，随后用PCR技术将它们的tTA基因（350bp）和CCKR-2基因（550bp）进行扩增，该技术包括的三个步骤是        ，将扩增产物用电泳检测，结果如图所示，图中        （填数字）为dtg模型鼠。
$德优题库$
（3）第三步：对dtg模型鼠的DNA进行基因测序。该过程所利用的技术是        ，进行该步骤的原因是        。

共享时间:2024-05-19 难度:1 相似度:2

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154472. （2021•西安中学•高二上期末）干扰素是用于治疗病毒感染和癌症的免疫活性蛋白质，如图1是构建干扰素工程菌的过程示意图。回答下列问题：
$德优题库$
（1）③过程将B导入大肠杆菌，需用       对大肠杆菌进行处理，使其处于能       的生理状态。
（2）要检测B是否导入大肠杆菌，将③过程后的大肠杆菌先接种于含       的培养基上，然后将在该培养基上生长的大肠杆菌接种在含       的培养基上，在前者培养基上能生长而在后者培养基上不能生长的是导入B的工程菌。
（3）利用图中工程菌不能生产有活性的干扰素，这是因为       。
（4）基因工程在农牧业、工业、环境、能源和医药卫生等方面展示出美好的前景，图2是转基因抗冻番茄培育过程的部分示意图（amp^r为抗氨苄青霉素基因），甲、乙表示相关结构或细胞。PstI酶和SmaI酶切割基因后将产生不同的黏性末端。图中甲代表的是       ，可用       和       提取鱼的抗冻蛋白基因以避免目的基因末端发生任意连接。

共享时间:2021-02-20 难度:1 相似度:2

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154424. （2022•莲湖区•高二下期末） $德优题库$ 鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子，广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因，构建基因表达载体，通过农杆菌介导法导入烟草，以获得抗病毒烟草。如图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作。回答问题：
（1）目的基因合成后可在Taq酶的作用下通过PCR技术大量扩增，该技术的原理是        。
（2）基因表达载体中的启动子是        酶识别和结合的部位。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种限制酶，选择的原则是：Ti质粒内，每种限制酶有1个切割位点，酶切后，目的基因形成的两个黏性末端序列        （填“相同”或“不相同”）。
（3）步骤③将基因表达载体导入农杆菌常用的方法是        。
（4）步骤④中，科研人员提取烟草愈伤组织细胞的RNA后，先通过        获得DNA，再进行PCR扩增。若最终未能检测出干扰素基因，可能原因是        。

共享时间:2022-07-02 难度:1 相似度:2

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154305. （2022•雁塔二中•高二下期末）新冠疫情出现后，病毒核酸检测和疫苗接种在疫情防控中发挥了重要作用。回答下列问题。
（1）新冠病毒是一种RNA病毒，检测新冠病毒RNA（核酸检测）可以采取RT-PCR法。这种方法的基本原理是先以病毒RNA为模板合成cDNA，这一过程需要的酶是        ，再通过PCR技术扩增相应的DNA片段。根据检测结果判断被检测者是否感染新冠病毒。
（2）为了确保新冠病毒核酸检测的准确性，在设计PCR引物时必须依据新冠病毒RNA中的        来进行。PCR过程每次循环分为3步，其中温度最低的一步是        。
（3）某人同时进行了新冠病毒核酸检测和抗体检测（检测体内是否有新冠病毒抗体），若核酸检测结果为阴性而抗体检测结果为阳性，说明        （答出1种情况即可）；若核酸检测和抗体检测结果均为阳性，说明        。
（4）常见的病毒疫苗有灭活疫苗、蛋白疫苗和重组疫苗等。已知某种病毒的特异性蛋白S（具有抗原性）的编码序列（目的基因）。为了制备蛋白疫苗，可以通过基因工程技术获得大量蛋白S。基因工程的基本操作流程是        。

共享时间:2022-07-10 难度:1 相似度:2

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152905. （2024•西安中学•高二下期末）通过基因工程技术能大量生产人生长激素。图1所示为人工构建的大肠杆菌质粒pBR322，是由三种质粒经复杂重组过程而构建。其上含氨苄青霉素抗性基因（Amp^r ）、四环素抗性基因（Tet^t）。图2为相关限制酶的识别序列和酶切位点。请回答下列问题：
$德优题库$
（1）人工构建pBR322质粒需要的酶有        。
（2）生产生长激素需从人垂体细胞中提取mRNA，逆转录得到DNA，以该DNA为        进行大量复制，获得相应的目的基因。
（3）为了构建重组质粒，采用Pst I、EcoR I处理目的基因和质粒，与只用Pst I处理相比，这样操作的优势是：       。将构建的重组质粒导入大肠杆菌后，为了排除普通大肠杆菌（无pBR322质粒）、空质粒大肠杆菌（含pBR322质粒但没有目的基因）的干扰，进行了进一步检测。配制甲、乙两种培养基，甲培养基含四环素，乙培养基含四环素和氨苄青霉素。含目的基因的大肠杆菌在甲培养基上        （填“能”或“不能”）生存，在乙培养基上
       （填“能”或“不能”）生存。
（4）导入受体细胞后，常用        技术检测生长激素在大肠杆菌中是否成功表达。
（5）基因工程的应用十分广阔，可用转基因牛制作乳腺生物反应器，从乳汁中提取药物，则该操作过程中选择的受体细胞是        ，原因是        。

共享时间:2024-07-03 难度:1 相似度:2

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157794. （2022•铁路中学•高二下二月）继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展．最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中．请回答：
（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是       ．
（2）在基因工程中，将目的基因与运载体结合时必须用       酶．进行基因转移时，通常要将外源基因转入       中，原因是       ．
（3）通常采用       技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组．
（4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的       细胞中特异表达．
（5）为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠体细胞的       细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体．该技术称为       ．

共享时间:2022-06-16 难度:1 相似度:2

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153400. （2023•长安区一中•高二下期末）干旱会影响农作物产量，科学家们对此进行了研究。如图为用探针检验某一抗旱植物基因型的原理，相关基因用R和r表示。请据图分析回答下列问题：
$德优题库$
（1）基因R与r的本质区别是        的不同。在利用PCR技术扩增R或r基因过程中，利用        可寻找抗旱基因的位置并进行扩增。
（2）若被检植物发生A现象，不发生B、C现象，则被检植物的基因型为        。
（3）用从基因文库中获取目的基因的方法获取抗旱基因时需要用到限制酶，限制酶的具体作用的化学键是        。
（4）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，其依据主要是当植物受到损伤时、伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物，吸引农杆菌移向这些细胞，这时农杆菌中的Ti质粒上的        可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞        上。
（5）经检测，抗旱基因已经导入烟草细胞，但未检测出抗旱基因转录出的mRNA，从构建基因表达载体的角度推测，最可能的原因是        。

共享时间:2023-07-21 难度:2 相似度:1.5

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153258. （2023•师大附中•高二下期末）紫杉醇因其具有高抗癌活性，被广泛用于乳腺癌等癌症的治疗。最初，用于研究和临床试验的紫杉醇都是从短叶红豆杉树皮中提取的。
Ⅰ.科研人员通过如下所示的方法来生产紫杉醇是扩大紫杉醇来源的一条重要途径。回答下列问题：
外植体→^①愈伤组织→^②液体培养基中悬浮振荡培养→细胞悬浮培养与继代→提取、检测紫杉醇
（1）图中生产紫杉醇的过程中，主要利用植物细胞培养技术和        技术。
（2）外植体常选取红豆杉植物的茎尖，其优点是        （写出1点）
Ⅱ.研究人员将紫杉醇合成关键酶基因Bapt导入红豆杉细胞内，以提高红豆杉细胞培养物中紫杉醇的产量。如下图示。
$德优题库$
（3）过程②使用的工具酶是        。
（4）p1303载体上有一种叫增强子的元件，结合题意推测增强子的作用是        。除了与目的基因复制表达有关的功能元件之外，p1303载体上还应有        基因。
（5）       （选填“能”或“不能”）通过Bapt基因探针来检测步骤⑤是否成功，原因是        。
（6）为检验最终的实验目的是否达到，还应检测        。

共享时间:2023-07-14 难度:2 相似度:1.5

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156412. （2023•西安一中•高三上一月）某DNA病毒对动物养殖业危害十分严重。研究人员拟以该病毒抗原蛋白A来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。
$德优题库$
回答下列问题：
（1）获取基因A：用于制备蛋白A的基因称为        ，获取该基因的常用方法是先建立        ，用一定方法“钓取”相应基因克隆片段后通过        技术扩增，扩增的原料是        。
（2）工程菌转化：将工程菌放于低温、低浓度        溶液中，造成细胞膜通透性改变，成为        细胞，通过一定手段将外源DNA导入细胞完成转化。
（3）筛选获得杂交瘤细胞：在杂交瘤细胞筛选中，常使用特殊选择培养基如        培养基，该培养基对        和        两类细胞的存活和繁殖具有抑制作用。
（4）特定杂交瘤细胞的培养和单克隆抗体的筛选：特定杂交瘤细胞培养常用搅拌式发酵罐，培养时需注意控制如        等条件（写出2点）。发酵罐中营养物质通常需加入葡萄糖、氨基酸、激素、无机盐和        ，以及诱导抗体分泌的化学物质，如丁酸钠。发酵罐内细胞增殖形成        （细胞株/细胞系），其分泌的抗体可利用        技术筛选。罐内上清液中单克隆抗体含少量杂质，可采用        方法纯化。

共享时间:2023-10-11 难度:3 相似度:1.33

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156823. （2022•长安区一中•高三上二月） 2018年11月，一对名为“露露”和“娜娜”的基因编辑婴儿的诞生引发了国内巨大的争议。基因编辑过程的实质是用特殊的引导序列将“基因剪刀——Cas9酶”精准定位到所需修饰的基因上然后进行编辑。据此回答下列问题：
（1）科学家用        法将特殊的引导序列与“基因剪刀——Cas9酶”导入目的细胞，上述实例中目的细胞为        。
（2）“露露”与“娜娜”其实也是试管婴儿，试管婴儿需让成熟且        的精子与成熟的卵细胞结合形成受精卵，然后进行早期胚胎培养。该时期所采用的培养条件是：营养条件、       、适宜的温度和pH、       。早期胚胎移入代孕母亲的子宫后，能成活并生长的生理学基础是        。
（3）胚胎干细胞在功能上具有        ，通常可以从        中分离得到。

共享时间:2022-12-28 难度:3 相似度:1.33

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dygzswyn

2024-07-06

高中生物 | 高二下 | 解答题

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2023-2024学年陕西省西安市高新一中高二（下）期末生物试卷

更新:2024-07-06 07:45浏览量:8

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