新冠疫情出现后病毒核酸检测和疫苗接种在疫情防控中发挥了重要作用回答下列问题新冠病毒是一种病毒检测新冠病毒核酸检测可以采取法这种方法的基本原理是先以病毒为模板合成这一过程需要的酶是再通过技术扩增相应的片段根据检测结果判断被检测者是否感染新冠病毒为了确保新冠病毒核酸检测的准确性在设计引物时必须依据新冠病毒中的来进行过程每次循环分为步其中温度最低的一步是

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154305. （2022•雁塔二中•高二下期末）新冠疫情出现后，病毒核酸检测和疫苗接种在疫情防控中发挥了重要作用。回答下列问题。
（1）新冠病毒是一种RNA病毒，检测新冠病毒RNA（核酸检测）可以采取RT-PCR法。这种方法的基本原理是先以病毒RNA为模板合成cDNA，这一过程需要的酶是        ，再通过PCR技术扩增相应的DNA片段。根据检测结果判断被检测者是否感染新冠病毒。
（2）为了确保新冠病毒核酸检测的准确性，在设计PCR引物时必须依据新冠病毒RNA中的        来进行。PCR过程每次循环分为3步，其中温度最低的一步是        。
（3）某人同时进行了新冠病毒核酸检测和抗体检测（检测体内是否有新冠病毒抗体），若核酸检测结果为阴性而抗体检测结果为阳性，说明        （答出1种情况即可）；若核酸检测和抗体检测结果均为阳性，说明        。
（4）常见的病毒疫苗有灭活疫苗、蛋白疫苗和重组疫苗等。已知某种病毒的特异性蛋白S（具有抗原性）的编码序列（目的基因）。为了制备蛋白疫苗，可以通过基因工程技术获得大量蛋白S。基因工程的基本操作流程是        。

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[考点]

基因工程的操作过程综合，

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[解析]

解：（1）以病毒RNA为模板合成cDNA是逆转录过程，这一过程需要的酶是逆转录酶（或反转录酶）。获得cDNA后可通过PCR技术扩增相应的DNA片段。根据检测结果判断被检测者是否感染新冠病毒。
（2）为确保PCR扩增获得的是特异性序列，从而确保新冠病毒核酸检测的准确性，设计PCR引物时必须依据新冠病毒RNA中的特异性核苷酸序列来进行。PCR过程每次循环分为3步，即变性（94℃）→复性（55℃）→延伸（72℃），其中温度最低的一步是复性（或退火）。
（3）某人同时进行了新冠病毒核酸检测和抗体检测，若核酸检测结果为阴性而抗体检测结果为阳性，说明他体内没有新冠病毒，但曾感染新冠病毒，已经康复；若核酸检测和抗体检测结果均为阳性，说明他体内已感染新冠病毒，是患者。
（4）基因工程的基本操作流程依次是获取目的基因→构建基因表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定。
故答案为：
（1）逆转录酶（或反转录酶）
（2）特异性核苷酸序列复性（或退火）
（3）曾感染新冠病毒，已康复已感染新冠病毒，是患者
（4）获取目的基因→构建基因表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定

[点评]

本题考查了"基因工程的操作过程综合，"，属于"基础题"，熟悉题型是解题的关键。

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240526. （2014•师大附中•高三上一月）植酸酶，是酶的品种之一，在动物饲料加工中发挥重要作用．植酸酶能分离出植酸分子中的磷，将植酸（盐）降解为肌醇和无机磷，同时释放出与植酸（盐）结合的其它营养物质．
（1）饲料加工过程温度较高，要求植酸酶具有较好的高温稳定性．利用蛋白质工程技术对其进行改造时，首先必须了解植酸酶的       ，最终通过改变植酸酶的       ，再通过基因工程得到新的植酸酶．
（2）培育转植酸酶基因的大豆，可提高其作为饲料原料磷的利用率．将植酸酶基因导入大豆细胞最常用的方法是       ．
（3）为了提高猪对饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过       方法转入猪的       中．将早期胚胎培养至一定时期通过       方法，从而一次得到多个转基因猪个体．
（4）若这些转基因植物被推广种植，可能会对生态环境产生怎样的影响？       ．

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155249. （2024•西安一中•高三下期中）胆囊收缩素（CCK）是一种能反复作用于大脑皮层海马体诱导其神经元活性的神经递质，胆囊收缩素受体2（CCKR-2）主要表达于大脑的边缘系统，能介导CCK诱导的焦虑相关症状。tTA基因表达的蛋白tTA可以结合到目的基因的启动子上，促进基因的表达。为研究CCK诱导的焦虑症发病机制，研究人员制备了前脑特异性tTA-CCKR-2双转基因小鼠（dtg）模型，主要步骤如下：
（1）第一步：构建转tTA基因鼠和转CCKR-2基因鼠，流程如图所示。图中过程甲是        ；若只考虑导入一个目的基因到染色体上，则T中tTA基因纯合子所占的比例是        ，F₁中含CCKR-2基因的小鼠中纯合子所占的比例是        。
$德优题库$
（2）第二步：构建tTA-CCKR-2双转基因小鼠（dtg）模型。将上述获得的纯合子鼠杂交获得12只小鼠，随后用PCR技术将它们的tTA基因（350bp）和CCKR-2基因（550bp）进行扩增，该技术包括的三个步骤是        ，将扩增产物用电泳检测，结果如图所示，图中        （填数字）为dtg模型鼠。
$德优题库$
（3）第三步：对dtg模型鼠的DNA进行基因测序。该过程所利用的技术是        ，进行该步骤的原因是        。

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248683. （2018•陕西省•新课标Ⅱ）某种荧光蛋白（GFP）在紫外线或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因连接在GFP基因的5′末端，获得了L1-GFP融合基因（简称甲），并将其插入质粒PO，构建了真核表达载体P1，其部分结构和酶切点的示意图如下，图中E1～E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。
$德优题库$
回答下列问题：
（1）据图推断，该团队在将甲插入质粒PO时，使用了两种限制酶，这两种酶是       。使用这两种酶进行酶切是为了保证       ，也是为了保证       。
（2）将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后，若在该细胞中观察到了绿色的荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了       和       过程。
（3）为了获得含有甲的牛，该团队需要做的工作包括：将能够产生绿色荧光细胞的       移入牛的       中，体外培养，胚胎移植等。
（4）为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，某同学用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的       （填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”）作为PCR模板。

共享时间:2018-06-24 难度:1 相似度:2

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248647. （2021•陕西省•乙卷）用DNA重组技术可以赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中需要使用多种工具酶，其中4种限制性核酸内切酶的切割位点如图所示。
$德优题库$
回答下列问题：
（1）常用的DNA链接酶有E.coli DNA连接酶和T₄DNA连接酶。如图中        酶切割后的DNA片段可以用E.coli DNA连接酶连接。如图中        酶切割后的DNA片段可以用T₄DNA连接酶连接。
（2）DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是        。
（3）DNA重组技术中所用的质粒载体具有一些特征，如质粒DNA分子上有复制原点，可以保证质粒在受体细胞中能        ；质粒DNA分子上有        便于外源DNA插入；质粒DNA分子上有标记基因（如某种抗生素抗性基因）。利用抗生素可筛选出含质粒载体的宿主细胞，方法是        。
（4）表达载体含有启动子，启动子是指        。

共享时间:2021-06-16 难度:1 相似度:2

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248635. （2022•陕西省•乙卷）新冠疫情出现后，病毒核酸检测和疫苗接种在疫情防控中发挥了重要作用。回答下列问题。
（1）新冠病毒是一种RNA病毒，检测新冠病毒RNA（核酸检测）可以采取RT-PCR法。这种方法的基本原理是先以病毒RNA为模板合成cDNA，这一过程需要的酶是        ，再通过PCR技术扩增相应的DNA片段。根据检测结果判断被检测者是否感染新冠病毒。
（2）为了确保新冠病毒核酸检测的准确性，在设计PCR引物时必须依据新冠病毒RNA中的        来进行。PCR过程每次循环分为3步，其中温度最低的一步是        。
（3）某人同时进行了新冠病毒核酸检测和抗体检测（检测体内是否有新冠病毒抗体），若核酸检测结果为阴性而抗体检测结果为阳性，说明        （答出1种情况即可）；若核酸检测和抗体检测结果均为阳性，说明        。
（4）常见的病毒疫苗有灭活疫苗、蛋白疫苗和重组疫苗等。已知某种病毒的特异性蛋白S（具有抗原性）的编码序列（目的基因）。为了制备蛋白疫苗，可以通过基因工程技术获得大量蛋白S。基因工程的基本操作流程是        。

共享时间:2022-06-10 难度:1 相似度:2

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248623. （2023•陕西省•乙卷） GFP是水母体内存在的能发绿色荧光的一种蛋白。科研人员以GFP基因为材料，利用基因工程技术获得了能发其他颜色荧光的蛋白，丰富了荧光蛋白的颜色种类。回答下列问题。
（1）构建突变基因文库。科研人员将GFP基因的不同突变基因分别插入载体，并转入大肠杆菌制备出GFP基因的突变基因文库。通常，基因文库是指        。
（2）构建目的基因表达载体。科研人员从构建的GFP突变基因文库中提取目的基因（均为突变基因）构建表达载体，其模式图如下所示（箭头为GFP突变基因的转录方向）。图中①为        ，②为        ，其作用是        ；图中氨苄青霉素抗性基因是一种标记基因，其作用是        。
$德优题库$
（3）目的基因的表达。科研人员将构建好的表达载体导入大肠杆菌中进行表达，发现大肠杆菌有的发绿色荧光，有的发黄色荧光，有的不发荧光。请从密码子特点的角度分析，发绿色荧光的可能原因是        （答出1点即可）。
（4）新蛋白与突变基因的关联性分析。将上述发黄色荧光的大肠杆菌分离纯化后，对其所含的GFP突变基因进行测序，发现其碱基序列与GFP基因的不同，将该GFP突变基因命名为YFP基因（黄色荧光蛋白基因）。若要通过基因工程的方法探究YFP基因能否在真核细胞中表达，实验思路是        。

共享时间:2023-06-19 难度:1 相似度:2

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248580. （2024•陕西省•甲卷）某同学采用基因工程技术在大肠杆菌中表达蛋白E。回答下列问题。
（1）该同学利用PCR扩增目的基因。PCR的每次循环包括变性、复性、延伸3个阶段，其中DNA双链打开成为单链的阶段是        ，引物与模板DNA链碱基之间的化学键是        。
（2）质粒载体上有限制酶a、b、c的酶切位点，限制酶的切割位点如图所示。构建重组质粒时，与用酶a单酶切相比，用酶a和酶b双酶切的优点体现在        （答出两点即可）；使用酶c单酶切构建重组质粒时宜选用的连接酶        。
$德优题库$
（3）将重组质粒转入大肠杆菌前，通常先将受体细胞处理成感受态，感受态细胞的特点是        ；若要验证转化的大肠杆菌中含有重组质粒，简要的实验思路和预期结果是        。
（4）蛋白E基因中的一段DNA编码序列（与模板链互补）是GGGCCCAAGCTGAGATGA，编码从GGG开始，部分密码子见表。若第一个核苷酸G缺失，则突变后相应肽链的序列是        。

氨基酸	密码子
赖氨酸	AAG
精氨酸	AGA
丝氨酸	AGC
脯氨酸	CCA
脯氨酸	CCC
亮氨酸	CUG
甘氨酸	GGC
甘氨酸	GGG
终止	UGA

共享时间:2024-06-29 难度:1 相似度:2

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239746. （2017•西电中学•高二下二月）动物乳腺生物反应器是一项利用转基因动物的乳腺代替传统的生物发酵，进行大规模生产可供治疗人类疾病或用于保健的活性蛋白质的现代生物技术。目前科学家已在牛和羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要药品。大致过程如图所示：
$德优题库$
（1）在过程③中需要用到的工具酶有       和       。基因工程中除质粒外，       和       也可作为运载体。要使人的药用蛋白基因在奶牛乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、       、标记基因等部分。重组DNA分子导入受体细胞常用的方法是       。
（2）要实现超数排卵，应在性成熟雌牛发情周期的某一阶段用       处理。通过①采集的精子不能直接使成熟的卵子受精，原因是       。
（3）若要一次获得多只相同的转基因牛，应采用胚胎分割技术，此技术是       （有性生殖或无性生殖），胚胎分割移植后发育成小牛，这些小牛的基因型       （填“相同”或“不同”）。

共享时间:2017-06-29 难度:1 相似度:2

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239624. （2017•长安区一中•高二下一月）根据基因工程有关内容回答下列问题：
（1）在基因工程的基本操作程序中，核心的步骤是       ．
（2）构建基因的表达载体时，需要用       将目的基因和运载体连接起来．
（3）利用PCR技术扩增目的基因的前提，是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成       ．
（4）常用的将目的基因导入微生物细胞的方法是用       处理受体细胞，使其成为能吸收周围环境中DNA分子的       ．
（5）某农科院开展“转基因抗虫棉”的科技研究，成功地将某种能产生抗虫毒蛋白的细菌的抗虫基因导入棉花细胞中，得到的棉花新品种对棉铃虫的毒杀效果高达80%以上．
应用Ti质粒的原因是其上的       可转移到受体细胞并整合到受体细胞的基因组DNA上，因此携带外源基因的DNA片段必须插入到植物细胞       上（部位）．
（6）在基因工程的第四步中，要检测转基因生物的目的基因是否转录出了mRNA，采用的方法是       ．

共享时间:2017-04-23 难度:1 相似度:2

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184189. （2014•西工大附中•二模）干扰素是动物或人体细胞受病毒感染后产生的一类糖蛋白，具有抗病毒、抑制肿瘤及免疫调节等多种生物活性．请分析回答：
（1）干扰素的产生受细胞内基因的控制，通常处于抑制状态．在病毒刺激下，干扰素基因经       、翻译形成干扰素前体，进一步加工后形成成熟的干扰素，通过       方式分泌到细胞外．
（2）某些干扰素可作用于宿主细胞膜上的相应受体，激活该细胞核中基因表达产生多种抗
病毒蛋白，其中有些蛋白可通过激活RNA酶使病毒的mRNA       ，有些则可与       （细胞器）结合，通过抑制病毒多肽链的合成发挥抗病毒作用．
（3）某些干扰素可抑制肿瘤细胞DNA的合成，通过减慢细胞       分裂过程抑制肿瘤．还有些干扰素可提高吞噬细胞将抗原呈递给       细胞的能力，从而在免疫调节中发挥作用．
（4）获取干扰素的传统方法是从人的白细胞中提取，但产量很低．科学家利用       酶将干扰素基因与牛乳腺蛋白基因的启动子（即RNA聚合酶       的部位）等调控组件连接在一起，采用       的方法将重组DNA导入牛的       细胞中，经胚胎早期培养一段时间后移植入母体内发育成熟，即可获得能产生干扰素的转基因牛．大大提高了干扰素的产量．

共享时间:2014-03-24 难度:1 相似度:2

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183511. （2017•西安八十三中•二模）家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力．将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可提取干扰素用于制药．
（1）进行转基因操作前，需用       酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞．
（2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入载体质粒的启动子和       之间．
（3）采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞．改PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、引物和       ．
（4）将目的基因导入动物细胞最常用的方法是       ．此方法的受体细胞多是       ．
（5）将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养时需要提供气体环境：95%空气+5%CO₂．
O₂是       所必需的，CO₂的主要作用       ；培养液应进行无菌处理．通常还要在培养液中添加一定量的       ，以防培养过程中的杂菌污染．此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害．

共享时间:2017-03-27 难度:1 相似度:2

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157657. （2022•关山中学•高二下三月）某实验室从马铃薯体内分离出某种酶的编码基因StNCED1，构建了马铃薯块茎特异表达启动子CIPP启动的StNCED1表达载体，最终获得休眠期延长的转基因马铃薯，其实验流程如图所示。请回答下列问题：
$德优题库$
（1）以块茎RNA为起点获取并扩增StNCED1基因的技术称为RT-PCR技术，该过程中需要加入的酶是        ，需要加入的原料是        。
（2）上述实验流程中核心操作的目的是        。
（3）CIPP等启动子的作用是        。
（4）为检测目的基因是否转人马铃薯细胞的染色体DNA上，可采用        技术，以        为探针进行杂交。除该水平之外，还可在        水平上进行鉴定。

共享时间:2022-07-23 难度:1 相似度:2

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155727. （2024•西安市蓝田县城关中学•高二下期中）为使水稻获得抗除草剂性状，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入水稻植株，获得抗草甘膦转基因水稻。
$德优题库$
（1）将草甘膦抗性基因作为       ，与Ti质粒用相同的       和DNA连接酶处理构建基因表达载体。
（2）用       处理农杆菌后获得感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在添加       的培养基中，经筛选1得到含基因表达载体的农杆菌。
（3）利用PCR技术，可以鉴定被侵染的愈伤组织中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下：
5'---ATGGCT………AGGAAC---3'
3'---TACCGA………TCCTTG---5'
根据上述序列应选择引物       （填字母）进行PCR。
A．引物：5'-TACCGA-3'
B．引物：5'-GTTCCT-3'
C．引物：5'-AUGGCU-3'
D．引物：5'-ATGGCT-3'
（4）PCR扩增时需要根据草甘膦抗性基因序列设计       种引物，其原因是       。
（5）除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否       。两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过细胞的       过程，获得转基因水稻。

共享时间:2024-05-15 难度:1 相似度:2

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154472. （2021•西安中学•高二上期末）干扰素是用于治疗病毒感染和癌症的免疫活性蛋白质，如图1是构建干扰素工程菌的过程示意图。回答下列问题：
$德优题库$
（1）③过程将B导入大肠杆菌，需用       对大肠杆菌进行处理，使其处于能       的生理状态。
（2）要检测B是否导入大肠杆菌，将③过程后的大肠杆菌先接种于含       的培养基上，然后将在该培养基上生长的大肠杆菌接种在含       的培养基上，在前者培养基上能生长而在后者培养基上不能生长的是导入B的工程菌。
（3）利用图中工程菌不能生产有活性的干扰素，这是因为       。
（4）基因工程在农牧业、工业、环境、能源和医药卫生等方面展示出美好的前景，图2是转基因抗冻番茄培育过程的部分示意图（amp^r为抗氨苄青霉素基因），甲、乙表示相关结构或细胞。PstI酶和SmaI酶切割基因后将产生不同的黏性末端。图中甲代表的是       ，可用       和       提取鱼的抗冻蛋白基因以避免目的基因末端发生任意连接。

共享时间:2021-02-20 难度:1 相似度:2

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152905. （2024•西安中学•高二下期末）通过基因工程技术能大量生产人生长激素。图1所示为人工构建的大肠杆菌质粒pBR322，是由三种质粒经复杂重组过程而构建。其上含氨苄青霉素抗性基因（Amp^r ）、四环素抗性基因（Tet^t）。图2为相关限制酶的识别序列和酶切位点。请回答下列问题：
$德优题库$
（1）人工构建pBR322质粒需要的酶有        。
（2）生产生长激素需从人垂体细胞中提取mRNA，逆转录得到DNA，以该DNA为        进行大量复制，获得相应的目的基因。
（3）为了构建重组质粒，采用Pst I、EcoR I处理目的基因和质粒，与只用Pst I处理相比，这样操作的优势是：       。将构建的重组质粒导入大肠杆菌后，为了排除普通大肠杆菌（无pBR322质粒）、空质粒大肠杆菌（含pBR322质粒但没有目的基因）的干扰，进行了进一步检测。配制甲、乙两种培养基，甲培养基含四环素，乙培养基含四环素和氨苄青霉素。含目的基因的大肠杆菌在甲培养基上        （填“能”或“不能”）生存，在乙培养基上
       （填“能”或“不能”）生存。
（4）导入受体细胞后，常用        技术检测生长激素在大肠杆菌中是否成功表达。
（5）基因工程的应用十分广阔，可用转基因牛制作乳腺生物反应器，从乳汁中提取药物，则该操作过程中选择的受体细胞是        ，原因是        。

共享时间:2024-07-03 难度:1 相似度:2

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2022-07-10

高中生物 | 高二下 | 解答题

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