[答案]
(1)限制酶、DNA连接酶
(2)模板
(3)用PstⅠ、EcoRⅠ处理目的基因和质粒,因形成的黏性末端不同可避免目的基因—目的基因(环化)、质粒—质粒(环化)等错误连接形式(避免产生错误连接方式即给分) 能 不能
(4)抗原﹣抗体杂交
(5)牛的受精卵 动物受精卵具有全能性(动物不能像植物那样,利用一个除受精卵以外的独立的体细胞直接培养成完整的个体)
[解析]
解:(1)分析题意可知,构成pBR322质粒,即基因的表达载体,需要用限制酶切割质粒,再用DNA连接酶将目的基因与质粒连接起来。
(2)分析题意可知,从人垂体细胞中提取mRNA,逆转录得到DNA,再以该DNA模板,进行PCR,大量扩增获得目的基因,所以答案是模板。
(3)分析题图可知,PstⅠ、EcoRⅠ识别序列不同,切割目的基因和质粒形成的黏性末端不同,利用DNA连接酶构建基因表达载体时,可避免目的基因—目的基因(环化)、质粒—质粒(环化)等错误连接形式。分析题图可知,PstI破坏了氨苄青霉素抗性基因(Ampr),构建的重组质粒无氨苄青霉素抗性,但具有四环素抗性,而甲培养基中含有四环素,因此,含重组质粒的大肠杆菌能在甲培养基上生存;乙培养基中含有含四环素和氨苄青霉素,能杀死含有目的基因的大肠杆菌,即该菌不能在乙培养基中生存。
(4)分析题意可知,将目的基因导入受体细胞后,该细胞能合成生长激素,因此常用抗原﹣抗体杂交技术检测目的基因是否成功表达。
(5)根据题意分析可知,若要制作牛乳腺生物反应器,需要先培育转基因牛,利用牛的受精卵作为受体细胞,导入目的基因后再经过培育获得转基因牛,因为动物体细胞不具有全能性,而受精卵具有全能性,能发育为一个完整的个体。
故答案为:
(1)限制酶、DNA连接酶
(2)模板
(3)用PstⅠ、EcoRⅠ处理目的基因和质粒,因形成的黏性末端不同可避免目的基因—目的基因(环化)、质粒—质粒(环化)等错误连接形式(避免产生错误连接方式即给分) 能 不能
(4)抗原﹣抗体杂交
(5)牛的受精卵 动物受精卵具有全能性(动物不能像植物那样,利用一个除受精卵以外的独立的体细胞直接培养成完整的个体)
[点评]
本题考查了"基因工程的操作过程综合,",属于"基础题",熟悉题型是解题的关键。