研究人员利用小鼠的单倍体细胞只有一个染色体组成功培育出转基因小鼠其主要技术流程如图所示请分析回答下列问题注代表四种限制酶箭头指向的位置为限制酶的切割位置是氨苄青霉素抗性基因是抗性基因利用技术可以扩增目的基因反应体系中除含绶冲液模板包含引物以外还应含有引物应选用下图中的填图中标号在基因工程操作步骤中过程称为

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183271. （2020•西安中学•二模）研究人员利用小鼠的单倍体ES细胞（只有一个染色体组），成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如图所示，请分析回答下列问题：
$德优题库$
注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶。箭头指向的位置为限制酶的切割位置：Amp^r是氨苄青霉素抗性基因，Neo^r是G418抗性基因。
（1）利用PCR技术可以扩增目的基因，PCR反应体系中除含绶冲液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物以外，还应含有       ；引物应选用下图中的       （填图中标号）。
$德优题库$
（2）在基因工程操作步骤中，过程①②称为       。已知氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neo^r的小鼠细胞。结合上图推测，过程①选用的2种限制酶是       （选填图中的编号），③处的培养液应添加       （填“氨苄青霉素”或“G418”）
（3）细胞乙与       类似，图中桑葚胚需通过       技术移入代孕小鼠子宫内继续发育，进行该操作前需对受体小鼠进行       处理。

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[考点]

基因工程的操作过程综合，

[答案]

见试题解答内容

[解析]

解：（1）根据分析可知，PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物以外，还应含有耐高温的DNA聚合酶。为了扩增目的基因的片段，根据图示可知需要在引物A和D作用下以目的基因的两条链为模板合成子代目的基因。（2）由图可知，过程①②是将目的基因和运载体连接形成重组质粒，即基因表达载体的构建过程。重组质粒上的抗生素抗性基因可作为标记基因，其作用是有利于筛选出含有目的基因的细胞。根据题意可知，氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neo′的小鼠细胞，因此应选择Neo′作为标记基因，即质粒上Neo′不能用限制酶切割，则过程①应选用Ⅰ和Ⅱ两种限制酶，图中③处的培养液应添加G418以便于起到筛选的作用。
（3）处理形成的细胞乙与受精卵类似，应用早期胚胎培养技术可以使其发育成桑葚胚。再将桑葚胚通过胚胎移植技术移入代孕小鼠子宫内继续发育，进行该操作前需对受体小鼠进行同期发情处理，以保证供体与受体处于相同或相近的生理状态。
故答案为：
（1）TaqDNA聚合酶（或耐高温的DNA聚合酶）　A和D
（2）基因表达载体的构建Ⅰ和ⅡG418
（3）受精卵　胚胎移植　同期发情

[点评]

本题考查了"基因工程的操作过程综合，"，属于"常考题"，熟悉题型是解题的关键。

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相似题 全部同步专题复习模拟真题联考专练月考周考期中期末单元寒假暑假副题

174397. （2022•师大附中•高二下期中） B基因存在于水稻基因组中，其在体细胞（2n）和精子中正常表达，但在卵细胞中不转录，为研究B基因表达对卵细胞的影响，设计了如下实验。
$德优题库$
据图回答：
（1）B基因在水稻细胞中不转录，推测其可能的原因是卵细胞中       。
A．含B基因的染色体缺失
B．DNA聚合失活
C．B基因发生基因突变
D．B基因的启动子无法启动转录
（2）从水稻体细胞       中提取总RNA，构建       文库，进而获得B基因编码蛋白的序列：将该序列与Luc基因（表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光）连接成融合基因（表达的蛋白质能保留两种蛋白质各自的功能），然后构建重组表达载体。
（3）在过程①②转化选时，过程       中T-DNA整合到受体细胞染色体上，过程       在培养基中应加入卡那霉素。
（4）获得转基因植株过程中，以下鉴定筛选方式正确的是       。
A．将随机断裂的B基因片段制备成探针进行DNA分子杂交
B．以Luc基因为模板设计探针进行DNA分子杂交
C．以B基因编码蛋白的序列为模板设计探针与从卵细胞提取的mRNA杂交
D．检测加入荧光素的卵细胞中是否发出荧光

共享时间:2022-05-15 难度:1 相似度:2

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183242. （2020•西安中学•六模）蛛丝蛋白纤维是目前已知的最坚韧的天然纤维之一，又被称为“生物钢”。为了提高羊毛纤维的拉伸强度，科学家将蜘蛛牵丝蛋白基因整合到羊胎儿成纤维细胞，并用此细胞作为核供体，结合核移植技术，成功获得了能合成蛛丝蛋白的转基因细毛羊。回答下列问题。
（1）检测蜘蛛牵丝蛋白基因是否成功导入到羊胎儿成纤维细胞，一般采用的方法是       ，可使用       作为探针对目的基因检测。
（2）将转基因成功的羊胎儿成纤维细胞作为核供体细胞，在对其进行体外培养时，传代一般都控制在10代以内，原因是       。
（3）用细毛羊卵母细胞作为核移植的受体，在核移植之前必须先对卵母细胞进行的操作有       。
（4）为检测出生小羊是否成功表达牵丝蛋白基因，可采用的方法有       （填序号）。
①DNA测序②染色体倍性分析③体细胞结构分析④抗原-抗体杂交⑤对羊毛纤维进行拉伸度测试
（5）为了提高已有重组胚胎的利用率，可采用       技术，但此技术产生同卵多胚的数量是有限的，从后代数量的角度分析，采用羊胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆的优势在于       。

共享时间:2020-05-23 难度:1 相似度:2

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184121. （2015•交大附中•三模）补充正常凝血因子F8可以治疗甲型血友病，因此可以利用转基因技术人工生产F8．某种大肠杆菌的质粒中含有β-半乳糖苷酶α片段序列（图2），大肠杆菌的DNA分子中则含有β-半乳糖酶ω片段序列（图1），由于天然大肠杆菌同时具备这两种片段序列，可以使培养基中含有X-gal底物转变成蓝色产物，当缺少任意一个α或ω片段序列，X-gal底物不能转变成蓝色产物．HindⅢ、EcoRI、BamHI分别为三种限制性内切酶，图3中箭头所指为三种限制酶的切点．
$德优题库$
（1）要能筛选出转基因菌种，应选用的限制性内切酶是       ，选择的依据是切断       序列，为重组DNA分子的筛选提供       ，但又不破坏       和       基因．
（2）限制酶作用于DNA的部位是
A．氢键           B．糖苷键          C．磷酸二酯键          D．肽键
（3）控制F₈的基因也可以通过人体细胞相应的mRNA来合成，该合成的过程称为       ．
（4）将经转基因技术处理过的质粒导入经       处理的过的处于       态的大肠杆菌后，再将大肠杆菌接种到含有X-gal底物的培养基培养一段时间后，培养基中出现较多的蓝色菌落，这是因为同一种限制酶作用的目的基因、质粒具有相同的       ，因此会出现质粒的自我环化的空载现象，空载质粒含有       ，能利用培养基中的X-gal底物产生蓝色产物．非蓝色菌落       （是/否）一定成功转入目的基因．

共享时间:2015-04-02 难度:1 相似度:2

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183778. （2016•师大附中•六模）毛角蛋白Ⅱ型中间丝基因（KIFⅡ）与绒山羊的羊绒质量密切相关．图甲表示含KIFⅡ基因的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图乙是获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程图（MspI、BamHI、MboI、SmaI四种限制性核酸内切酶识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG）．请分析回答：
$德优题库$
（1）用SmaI完全切割图甲中DNA片段，其最短的产物含       个bp.图甲中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d.从隐性纯合子中分离出图甲对应的DNA片段，用Sma I完全切割，产物中不同长度的DNA片段有        种．
（2）上述工程中，KIFⅡ称为       ；为了提高试验成功率，需要通过       技术进行       扩增，以获得更多的KIFⅡ．
（3）过程①必须用到的工具酶是       ；在过程③中，为了获得更多的卵（母）细胞，需用       处理成年母绒山羊．
（4）过程④称为       ，进行过程⑤的最佳时期是       ．

共享时间:2016-05-22 难度:1 相似度:2

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183499. （2017•高新一中•一模）如图表示利用基因工程培育抗虫棉过程，请据图回答下列有关问题
$德优题库$
（1）若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-↓GATC-，限制酶Ⅱ识别序列和切点是-G↓GATCC-，那么在①过程中，应用限制酶       切割质粒，用限制酶       切割抗虫基因．
（2）将通过②过程得到的大肠杆菌涂布在含有       的培养基上，若能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒，反之则说明没有导入．
（3）要确定抗虫基因导入后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和检定工作，则在个体水平上的鉴定过程可简述为：       ．经筛选分析，该植株细胞中含有一个携带抗虫基因的DNA片段，因此可以把它看作诗杂合子．理论上，该转基因植株自交产生的F₁代中，仍具有抗虫特性的植株占总数的       ．
（4）⑤过程所用的现代生物技术称为       ，从遗传学角度来看，根据细胞通过⑤过程，能形成棉植株的根本原因是跟细胞具有       ．

共享时间:2017-03-13 难度:1 相似度:2

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183429. （2018•西安中学•九模）自然界中能够产生生物荧光的酶统称为荧光素酶。荧光素酶及其合成基因在生物研究中有着广泛的利用。
（1）荧光素酶基因常被作为基因工程中的标记基因，其作用是将       筛选出来。
（2）下表为4种限制酶的识别序列和酶切位点，下图为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切点。若需利用酶切法（只用一种酶）获得荧光素酶基因，最应选择的限制酶是       。
$德优题库$
（3）利用PCR技术扩增荧光素酶基因是利用       的原理，使荧光素酶基因数量呈       方式增加。
（4）迄今为止，可将上述具有荧光素酶基因的运载体导入动物细胞的技术，应用最多的、最有效的是       。经一系列步骤，将所获得的胚胎早期培养一段时间后，再移植到雌性动物的       或子宫内，使其发育成为具有新性状的动物。
（5）囊胚阶段的胚胎进行胚胎分割，可以提高胚胎的利用率，但在进行分割时应注意       ，其原因是       。

共享时间:2018-06-30 难度:1 相似度:2

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183344. （2019•未央区•二模）科学家欲培育奶牛乳腺生物反应器来生产人生长激素
（1）首先要从培养的人体细胞中利用PCR技术扩增人生长激素基因，在PCR扩增仪中添加的酶有       ，添加的dATP与ATP在结构上的区别是       。
（2）在构建表达运载体时用到的酶有       、       ，并且在表达运载体中、目的基因的前端一定要含有       启动子。
（3）将目的基因导入受体细胞时，只能选择       作为受体细胞，而且只能采用       方导入。
（4）导入了目的基因的细胞一般要培养到       阶段，取其       细胞进行目的基因的检测和鉴定，在此鉴定过程中能否采用抗原-抗体杂交法       （能/否），因为       。
（5）最后还需将此胚胎移植到经过       处理的同种雌性动物子宫中。在小牛出生之前科学家是否已经知道小牛的性别       （知道/不知道），因为       。最后、从此乳腺生物反应器得到的目的蛋白质，还需经过       鉴定。

共享时间:2019-03-15 难度:1 相似度:2

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183332. （2019•西安中学•四模）科学家将绿色荧光蛋白（GFP）基因转入小鼠胚胎干细胞（ES）内，GFP基因若表达就会使细胞带有绿色荧光，继而利用带有绿色荧光的ES细胞培育出嵌合型的小鼠沼于科学研究，流程如图所示．请回答：
$德优题库$
（1）在步骤①中构建基因表达载体时，需要在GFP基因的首端加入       酶识别和结合的部位，有了它才能驱动GFP基因转录出mRNA，最终获得GFP．GFP基因的尾端还需有       ，使转录在需要的地方停止下来．
（2）步骤②的受体细胞是小鼠ES细胞，ES细胞一般从囊胚的       分离得到．在培养ES细胞时，细胞充满培养皿底部后停止分裂，这种现象称为       ．如果想继续培养则是需要重新用       酶处理，然后分瓶继续培养，这样的培养过程通常被称为传代培养．
（3）图中重组囊胚在步骤⑤之前要先检测是否有       ，再通过       技术移入代孕母鼠子宫内继续发育．

共享时间:2019-04-25 难度:1 相似度:2

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181626. （2021•西安中学•二模） Anti基因是小型猪器官表面的抗原基因，人工合成的reAnti基因的模板链与Anti基因的模板链互补。科学家利用合成的reAnti基因培育出转基因猪，用于解决人类器官移植后免疫排斥的问题。回答下列问题：
（1）科学家可利用       技术获取大量reAnti基因。要想成功获取上述转基因猪，需要实施基因工程。基因工程的核心步骤是       的构建，这一关键操作的目的是：①使目的基因       ；②使目的基因能够表达和发挥作用。
（2）通常采用       法将人工合成的reAnti基因导入受体细胞（某种猪的       ）中，然后进行胚胎的早期培养。为了提高胚胎的利用率，可进行胚胎分割操作，在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将       均等分割，该部位细胞的特点及发育的趋势是       。
（3）转基因猪的细胞核中含有reAnti基因和Anti基因的情况是       ，转基因猪可以用于人类器官移植的原因是       。

共享时间:2021-03-21 难度:1 相似度:2

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174529. （2022•西安中学•高二下期中）如表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：

限制酶	BamHⅠ	BclⅠ	Sau3AⅠ	HindⅢ
识别序列及切割位点	$德优题库$	$德优题库$	$德优题库$	$德优题库$

$德优题库$
（1）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用       两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过       酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入处于       态的大肠杆菌。
（2）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加       。
（3）若BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为       ，对于该部位，这两种酶       （填“都能”、“都不能”或“只有一种能”）切开。
（4）假设所用的酶均可将识别位点完全切开，若用Sau3A I切图1质粒，能获得       种大小不同的DNA片段。
（5）常用PCR技术扩增目的基因，所用的引物组成为图2中       。该PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水、引物、模板DNA、       和       。

共享时间:2022-05-17 难度:1 相似度:2

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180559. （2018•西安中学•高三上期中）为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性，科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针，进行分子杂交实验，以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况．其基本流程如下图（Amp表示氨苄青霉素抗性基因；LacZ基因被SHH基因插入后不表达）
$德优题库$
请回答：
（1）重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时，       （填“需要”或“不需要”）启动子．
（2）步骤②中，用Ca²⁺处理大肠杆菌，使之成为        细胞，然后导入重组载体．实验中，用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌，未导入质粒的细菌将会死亡，原因是这些细菌不含有        基因．
（3）能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X-gal的培养基上会形成蓝色菌落，易于识别．根据上述原理可以初步判断        （填“蓝色”或“白色”）菌落中的大肠杆菌为重组菌．
（4）将制备的探针加入角化囊肿切片中，探针将与        形成杂交带，进而判断SHH基因的转录情况．

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179355. （2020•西安一中•高二下期中）干扰素是用于治疗病毒感染和癌症的免疫活性蛋白质，若人的干扰素基因在大肠杆菌内表达，产生的抗病毒性较低且保存困难，若将第17位的半胱氨酸改造为丝氨酸，则生产出的干扰素的抗病毒性是原来的100倍，且可在70℃条件下保存半年，如图1是构建干扰素工程菌的过程示意图。回答下列问题。
$德优题库$
（1）③过程将B导入大肠杆菌，需用       对大肠杆菌进行处理，使其处于       态。
（2）要检测B是否导入大肠杆菌，将③过程后的大肠杆菌先接种于含       的培养基上，然后将在该培养基上生长的大肠杆菌接种在含       的培养基上，在前者培养基上能生长而在后者培养基上不能生长的是导入B的工程菌。
（3）基因工程自20世纪70年代兴起之后，在短短40年间得到了飞速发展，目前成为生物科学核心技术，在农牧业、工业、环境、能源和医药卫生等方面展示出美好的前景，据相关资料回答下列有关问题：
如图2是转基因抗冻番茄培育过程的部分示意图（amp^r为抗氨苄青霉素基因），甲、乙表示相关结构或细胞。PstⅠ酶和SmaⅠ酶切割基因后将产生不同的黏性末端。图中甲代表的是       ，乙可代表       ，可用       和       提取鱼的抗冻蛋白基因以避免目的基因末端发生任意连接，用此二酶切割质粒产生的DNA片段有       种。

共享时间:2020-05-29 难度:1 相似度:2

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179175. （2020•西安中学•高二下期中）为了提高菊花抗冻能力，研究者从其他生物中克隆出抗冻基因C（图1），拟将其导入菊花中。回答下列问题：
$德优题库$
（1）基因工程中，构建重组质粒时需要用到的工具酶有：       。为使抗冻基因C在菊花细胞中高效表达，需要把目的基因片段插入表达载体的        和        之间。
（2）若想了解C基因是否整合到菊花染色体上，检测方法是采用        技术。
（3）若获得的转基因植株（抗冻基因C已经整合到菊花的基因组中）抗冻能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是        。
（4）借助农杆菌将重组质粒导入菊花细胞，在该过程中需添加酚类物质，目的是        。抗冻基因C的遗传特性能在菊花体内稳定存在的关键是        。

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175672. （2020•长安区一中•高三上期中）赖氨酸是人体的一种必需氨基酸。某草本植物甲含有A基因，其编码的蛋白质中富含赖氨酸。科学家通过基因工程培育出的转基因水稻也能合成甲的富含赖氨酸的蛋白质，水稻的营养价值随之提高。如图是获取转基因水稻的过程示意图，请回答下列问题：
$德优题库$
（1）利用①过程的方法获取的目的基因与植物甲的A基因在结构上       （填“相同”或“不相同”）。②过程中常需要用到的工具酶是       。
（2）通过②过程构建的重组质粒，除了目的基因外，还应该具备       等条件。
（3）在利用农杆菌转化法转基因时，需将目的基因插入到质粒的T一DNA中，原因是       。将携带了目的基因的农杆菌和水稻薄壁组织细胞共同培养时，需用酚类化合物对水稻细胞进行处理，这种处理的作用是       。
（4）在获得转基因水稻后，可采用核酸分子杂交技术对水稻细胞中是否存在A基因的转录产物进行检测，检测时需要用       制作基因探针。要确认A基因是否在转基因水稻植株中正确表达，除了进行分子检测外，有时还需要进行       的鉴定。
（5）若从预期的获取富含赖氨酸的蛋白质这一功能出发，依靠人工方法合成预期蛋白质的mRNA，再重复上述过程，此现代生物技术方法可称为       。

共享时间:2020-11-17 难度:1 相似度:2

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174954. （2022•周至四中•高二下期中）某种荧光蛋白（GFP）在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达，某科研团队将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因连接在GFP基因的5’末端，获得了L1-GFP融合基因（简称为甲），并将其插入质粒P0，构建了真核表达载体P1，其部分结构和酶切位点的示意图如图，图中E1～E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。回答下列问题：
$德优题库$
（1）据图推断，该团队在将甲插入质粒P0时，使用了两种限制酶，这两种酶是        ，使用这两种酶进行酶切是为了保证        ，也是为了保证        。
（2）将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后，若在该细胞中观察到了绿色荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了        和        过程。
（3）为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，某同学用PCR方法进行鉴定，在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的        （填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”）作为PCR模板。

共享时间:2022-05-20 难度:1 相似度:2

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2020-03-29

高中生物 | | 简答题

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2020年陕西省西安中学高考生物二模试卷

更新:2020-03-29 12:46浏览量:8

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