蛋白具有抑制细胞增殖的作用为初步探究某动物蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖的原因研究者从基因数据库中获取了该蛋白的基因编码序列简称基因大小为碱基对利用大肠杆菌表达该蛋白回答下列问题为获取基因提取该动物肝脏组织的总再经过程得到将其作为反应的模板并设计一对特异性引物来扩增目的基因图为所用载体图谱示意图图中限制酶的识别序列及切割位点见表为使基因该基因序列不含图中限制酶的

首页 > 试题列表 > 单题解析

174398. （2022•师大附中•高二下期中） PHB2蛋白具有抑制细胞增殖的作用。为初步探究某动物PHB2蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖的原因，研究者从基因数据库中获取了该蛋白的基因编码序列（简称phb2基因），大小为0.9kb（1kb=1000碱基对），利用大肠杆菌表达该蛋白。回答下列问题：
$德优题库$
（1）为获取phb2基因，提取该动物肝脏组织的总RNA，再经过程得到cDNA，将其作为PCR反应的模板，并设计一对特异性引物来扩增目的基因。
（2）图1为所用载体图谱示意图，图中限制酶的识别序列及切割位点见表。为使phb2基因（该基因序列不含图1中限制酶的识别序列）与载体正确连接，在扩增的phb2基因两端分别引入和两种不同限制酶的识别序列。经过这两种酶酶切的phb2基因和载体进行连接时，可选用（填“E.coli DNA连接酶”或“T4DNA连接醇”）。
相关限制酶的识别序列及切割位点

名称	识别序列及切割位点	名称	识别序列及切割位点
HindⅢ	A↓AGCTT TTCGA↑A	ECORⅠ	G↓AATTC CTTAA↑G
PstⅡ	CAG↓CTG GTC↑GAC	PstⅠ	CTGC↓AG GA↑CGTC
KpnⅠ	G↓GTACC CCATG↑G	BamHⅠ	G↓GATCC CCTAG↑G

注：箭头表示切割位点
（3）转化前需用caCl₂处理大肠杆菌细胞，使其处于        的生理状态，以提高转化效率。
（4）将转化后的大肠杆菌接种在含氨苄青霉素的培养基上进行培养，随机挑取单菌落（分别编号为1、2、3、4）培养并提取质粒，用（2）中选用的两种限制酶进行酶切，酶切产物经电泳分离，结果如图2，       号菌落的质粒很可能是含目的基因的重组质粒。
（5）将纯化得到的PHB2蛋白以一定浓度添加到人宫颈癌细胞培养液中，培养24小时后，检测处于细胞周期（示意图见图3）不同时期的细胞数量，统计结果如图4。分析该蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖可能的原因是将细胞阻滞在细胞周期的        （填“G₁”或“S”或“G₂/M”）期。

共享时间:2022-05-15 难度:1

纠错

下载

相似

组卷

[考点]

细胞增殖的意义和细胞周期，

[答案]

（1）逆转录

（2）ECORⅠPstⅡT4DNA连接酶

（3）感受态

（4）3

（5）G₂

[解析]

解：（1）利用RNA获得cDNA的过程称为逆转录。
（2）根据启动子和终止子的生理作用可知，目的基因应导入启动子和终止子之间。图中看出，两者之间存在于三种限制酶切点，但是由于KpnⅠ在质粒上不止一个酶切位点，所以应该选择ECORⅠ和 PstⅡ两种不同限制酶的识别序列；根据 PstⅡ的酶切序列，切出了平末端，所以构建基因表达载体时，应该用T4DNA连接酶连接质粒和目的基因。
（3）转化时用CaCl₂处理大肠杆菌细胞，使其处于感受态的生理状态，以提高转化效率。
（4）由于这些菌落都可以生长在含有氨苄青霉素的培养基中，因此都含有质粒，重组质粒包含了目的基因和质粒，如果用ECORⅠ和 PstⅡ两种酶切割重组质粒电泳后将获得含有质粒和目的基因两条条带，由于phb2基因大小为0.9kb，所以对应电泳图是菌落3。
（5）比较图4中G₁期和S期细胞减少，而G₂期细胞数目明显增多，说明了G₁期和S期细胞可以进入G₂期，而G₂期的细胞没有能够完成分裂进入G₁期，因此PHB2蛋白应该作用于G₂/M期。
故答案为：
（1）逆转录
（2）ECORⅠPstⅡT4DNA连接酶
（3）感受态
（4）3
（5）G₂/M

[点评]

本题考查了"细胞增殖的意义和细胞周期，"，属于"常考题"，熟悉题型是解题的关键。

转载声明：

本题解析属于发布者收集录入，如涉及版权请向平台申诉！！版权申诉

相似题 全部同步专题复习模拟真题联考专练月考周考期中期末单元寒假暑假副题

dygzswzl

2022-05-15

高中生物 | 高二下 | 简答题

下载量
浏览量
收益额

相关试卷 更多>>

2021-2022学年陕西师大附中高二（下）期中生物试卷

更新:2022-05-15 01:49浏览量:12

普通登录

手机登录

微信扫码立即登录