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157917. (2021•西安市•高三上一月) 水蛭素是一种小分子蛋白质,其对凝血酶有极强的抑制作用,是迄今为止所发现的最强凝血酶天然特异抑制剂。通过基因工程技术生产水蛭素的方法如下图所示。请据图回答:
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(1)过程①需要的原料是       ,过程③必需的酶有       ,过程④为提高导入效率,常用       溶液处理大肠杆菌。
(2)过程②中可通过       技术大量扩增水蛭素基因,被扩增的水蛭素基因必须有一段核苷酸序列是已知的,以便根据这一序列合成       
(3)水蛭素基因不含质粒图谱中限制酶识别序列。为使水蛭素基因重组进该质粒,水蛭素基因两端需分别加入不同限制酶              的识别序列。
(4)在导入重组质粒后,过程⑤为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加       的培养基进行培养。
共享时间:2021-10-22 难度:1
[考点]
基因工程的操作过程综合,
[答案]
见试题解答内容
[解析]
解:(1是通过反转录法形成cDNA的过程,此过程需要的原料是脱氧核苷酸(dNTPdATPdGTPdCTPdTTP)。是构建重组表达载体的过程,需要用限制酶切割质粒与目的基因,同时需要用DNA连接酶把目的基因与质粒连在一起,过程为提高导入效率,常用CaCl2溶液处理大肠杆菌。
2)过程中可通过PCR技术大量扩增水蛭素基因,被扩增的水蛭素基因必须有一段核苷酸序列是已知的,以便根据这一序列合成引物。
3)为使水蛭素基因重组进该质粒,需要用与质粒图谱中相同的识别序列的限制酶切割水蛭素基因,而图中的限制酶pvuI可破坏卡那霉素抗性基因,限制酶BssSI破坏复制原点,限制酶XbaI破坏启动子,限制酶SalI破坏终止子,因此为使水蛭素基因重组进该质粒,水蛭素基因两端需分别加入不同限制酶AscⅠ和BamHⅠ的识别序列。
4)在导入重组质粒后,过程为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加卡那霉素的培养基进行培养。
故答案为:
1)脱氧核苷酸(dNTPdATPdGTPdCTPdTTP     限制酶和DNA连接酶    CaCl2
2PCR    引物
3AscBamH
4)卡那霉素
[点评]
本题考查了"基因工程的操作过程综合,",属于"基础题",熟悉题型是解题的关键。
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157570. (2021•关山中学•高三上四月) β-葡萄糖苷酶(BglB)是工业生产中降解纤维素的关键酶,研究人员利用基因工程技术,将编码BglB的基因转移到了大肠杆菌的细胞中并使之表达。如图1~3分别表示BglⅡ、BamHⅠ两种限制酶的识别序列和酶切位点,及其在质粒和含凝乳酶基因的外源DNA片段上的切割位点。其中,质粒含有leu2基因,可用于合成亮氨酸,目的基因含有卡那霉素抗性基因KanR。回答下列问题:
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(1)在基因工程中,质粒和目的基因构建重组质粒时必需的工具酶有        。为了扩增重组质粒,需将其转入处于        态的大肠杆菌细胞中。
(2)根据图1分别写出BgIⅡ与BamHⅠ酶切后形成的末端序列               
(3)BgIⅡ酶切后的质粒与BamHⅠ酶切后的目的基因能够连接的原因是        
(4)将连接后的产物转入某种大肠杆菌,该细菌对卡那霉素敏感,且不能在缺乏亮氨酸的培养基中培养。使用BgIⅡ处理重组质粒,可以得到长度为        bp的环状DNA。若要筛选含有重组质粒的大肠杆菌,应选择        的培养基进行培养。
(5)大肠杆菌不能降解纤维素,但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力,这是因为        
共享时间:2021-02-28 难度:1 相似度:2

dygzswyn

2021-10-22

高中生物 | 高三上 | 实验题

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2020*西工大*期末
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