研究发现人溶菌酶是天然抗生素替代品科学家培育出转入溶菌酶基因山羊以大规模生产人溶菌酶从乳汁中提取过程如图所示其中编号表示过程质粒中的基因通过控制相关酶的合成而控制亮氨酸的合成亮氨酸是山羊细胞维持生命活动必不可少的一种必需氨基酸基因控制合成绿色荧光蛋白四种限制性内切核酸酶的识别序列及切割位点如表请回答下列问题限制酶识别序列和切割位点过程需要的限制性内切核

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156457. （2023•长安区一中•高三上二月） $德优题库$ 研究发现人溶菌酶（hLZ）是天然抗生素替代品。科学家培育出转入溶菌酶基因山羊，以大规模生产人溶菌酶（从乳汁中提取），过程如图所示。其中编号①～⑨表示过程；质粒S中的基因Leu通过控制相关酶的合成而控制亮氨酸的合成（亮氨酸是山羊细胞维持生命活动必不可少的一种必需氨基酸），基因GFP控制合成绿色荧光蛋白。四种限制性内切核酸酶的识别序列及切割位点如表。请回答下列问题：

限制酶	BamHⅠ	BglⅡ	HindⅢ	XbaⅠ
识别序列和切割位点	G'GATCC	A'GATCT	A'AGCTT	T'CTAGA

（1）过程②需要的限制性内切核酸酶是        ，在③中，B与切割后的质粒S用        酶连接，在两个片段相邻处形成        ，获得重组质粒T。
（2）为成功筛选出含重组质粒T的成纤维细胞，质粒S中用作标记基因的是        。为达到筛选目的，培养基的营养成分中特殊之处是        。若用PCR检测目的基因是否成功导入受体细胞中，实验组以待测的样本DNA为模板，使用目的基因的特异性引物进行PCR扩增，同时将以目的基因片段为模板的组别作为阳性对照组，将以        为模板的组别作为阴性对照组。
（3）过程⑧中        （填“需要”或“不需要”）添加胚胎成纤维细胞，图中早期胚胎的        （填结构）将发育成完整转基因羊个体。

共享时间:2023-12-11 难度:4

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[考点]

体外受精和胚胎移植，限制性内切核酸酶，DNA连接酶，基因工程的操作过程综合，

[答案]

（

）

BamH

Ⅰ、

Hind

Ⅲ；

DNA

连接；磷酸二酯键

（

）基因

Leu

、基因

GFP

；不含有亮氨酸；非目的基因片段

（

）不需要；内细胞团

[解析]

解：（1）过程②为对目的基因进行切割，结合切割出的黏性末端GATC、AGCT可知，需要的限制性内切核酸酶是BamHⅠ、HindⅢ；B与切割后的质粒S具有相同的黏性末端，可以用DNA连接酶连接形成磷酸二酯键，构建重组质粒T。
（2）基因GFP控制合成绿色荧光蛋白、Leu通过控制相关酶的合成而控制亮氨酸的合成，两者都为标记基因，有助于重组质粒的筛选。为达到筛选目的，培养基的营养成分中特殊之处是不含有亮氨酸，这样能生长的菌株即为含有普通质粒和重组质粒的菌株，重组质粒GFP基因被破坏，即能在缺乏亮氨酸的培养基上生长又不能表现为绿色的即为含重组质粒的菌株。以目的基因片段为模板的组别作为阳性对照组，若实验组导入成功，则也会出现与阳性对照组一样的条带，以非目的基因片段为模板的组别作为阴性对照组，表明电泳的准确性。
（3）胚胎成纤维细胞抑制分化，过程⑧为早期胚胎培养，需要分化，不需要添加胚胎成纤维细胞；早期胚胎的囊胚期的内细胞团细胞将发育成完整转基因羊个体。
故答案为：
（1）BamHⅠ、HindⅢ；DNA连接；磷酸二酯键
（2）基因Leu、基因GFP；不含有亮氨酸；非目的基因片段
（3）不需要；内细胞团

[点评]

本题考查了"体外受精和胚胎移植，限制性内切核酸酶，DNA连接酶，基因工程的操作过程综合，"，属于"综合题"，熟悉题型是解题的关键。

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156054. （2023•铁一中学•高二下期中） W是一种具有特定功能的人体蛋白质。某研究小组拟仿照制备乳腺生物反应器的研究思路，制备一种膀胱生物反应器来获得W，基本过程如图所示。
$德优题库$
（1）步骤①中需要使用的工具酶有        。步骤②和③所代表的操作分别是        和        。步骤④称为        。
（2）早期胚胎可以移植是因为受体子宫对外来胚胎        ，且外来胚胎可与受体子宫建立        ，使胚胎在受体子宫内存活并发育。
（3）一般来说，在同一动物个体中，乳腺上皮细胞与膀胱上皮细胞的细胞核中染色体DNA所含的遗传信息        （填“相同”或“不同”），原因是        。

共享时间:2023-05-15 难度:3 相似度:1.75

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152827. （2024•师大附中•高二上期末）某种转基因油菜的产油率明显高于普通油菜，原因是转入的基因A的表达产物可抑制油菜细胞内糖类和蛋白质的合成，促进丙酮酸大量转化为油脂。如图为科研人员培育产油率高的转基因油菜的主要过程示意图。请回答下列问题：
$德优题库$
（1）获取基因A后可利用        技术对其进行扩增，一个基因A通过该技术进行n次循环，一共需要消耗        对引物。
（2）我国科学家独创的将目的基因导入植物细胞的方法为        。图中将目的基因导入植物细胞的方法为农杆菌转化法，转化是指        。
（3）过程①中，通常将基因A插入到Ti质粒T-DNA中的        之间，以利于基因A的表达。过程④中，需要添加的具有启动细胞分裂、再分化作用的关键激素为        。经图示过程获得的油菜是否为产油率高的转基因油菜，还需要对其进行        的鉴定，该种鉴定方法属于个体生物学水平的鉴定，只有符合要求并通过安全性测试的转基因油菜才能推广并种植。

共享时间:2024-02-09 难度:1 相似度:1.25

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155727. （2024•西安市蓝田县城关中学•高二下期中）为使水稻获得抗除草剂性状，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入水稻植株，获得抗草甘膦转基因水稻。
$德优题库$
（1）将草甘膦抗性基因作为       ，与Ti质粒用相同的       和DNA连接酶处理构建基因表达载体。
（2）用       处理农杆菌后获得感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在添加       的培养基中，经筛选1得到含基因表达载体的农杆菌。
（3）利用PCR技术，可以鉴定被侵染的愈伤组织中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下：
5'---ATGGCT………AGGAAC---3'
3'---TACCGA………TCCTTG---5'
根据上述序列应选择引物       （填字母）进行PCR。
A．引物：5'-TACCGA-3'
B．引物：5'-GTTCCT-3'
C．引物：5'-AUGGCU-3'
D．引物：5'-ATGGCT-3'
（4）PCR扩增时需要根据草甘膦抗性基因序列设计       种引物，其原因是       。
（5）除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否       。两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过细胞的       过程，获得转基因水稻。

共享时间:2024-05-15 难度:1 相似度:1.25

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183571. （2016•西安中学•二模）逆转录病毒载体是目前应用较多的动物基因工程载体之一．运用逆转录病毒载体可以将外源基因插入到受体细胞染色体，使外源基因随染色体DNA一起复制和表达．研究发现逆转录病毒基因组（RNA）的核心部分包括三个基因：gag基因（编码病毒的核心蛋白）、pol基因（编码逆转录酶）、env基因（编码病毒的表面糖蛋白）．位于这些基因的两端有LTR序列（含有启动子、调节基因等），控制着逆转录基因组核心基因的表达及转移．如图是构建逆转录病毒载体及用于培育转基因小鼠的过程．回答下列问题： $德优题库$
（1）逆转录病毒的遗传信息储存在       ；过程①原料是       ．
（2）过程②中，外源基因一定要插入到病毒DNA的LTR序列中的启动子后，其主要目的       ．
（3）过程③中，导入病毒蛋白编码基因（gag,pol和env）的目的是       ．
（4）过程④中，逆转录病毒载体感染的细胞一般选择内细胞团细胞，因为这类细胞能       ．此时，早期胚胎处于       期．
（5）在胚胎移植前，需要对代孕母鼠进行       处理，才能使其生殖器官（子宫）适于早期胚胎的植入和正常发育．研究中必须对嵌合小鼠进行筛选，只有能产生       的嵌合小鼠才能将获得的新性状遗传给子代．

共享时间:2016-03-21 难度:1 相似度:1.25

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183511. （2017•西安八十三中•二模）家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力．将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可提取干扰素用于制药．
（1）进行转基因操作前，需用       酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞．
（2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入载体质粒的启动子和       之间．
（3）采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞．改PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、引物和       ．
（4）将目的基因导入动物细胞最常用的方法是       ．此方法的受体细胞多是       ．
（5）将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养时需要提供气体环境：95%空气+5%CO₂．
O₂是       所必需的，CO₂的主要作用       ；培养液应进行无菌处理．通常还要在培养液中添加一定量的       ，以防培养过程中的杂菌污染．此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害．

共享时间:2017-03-27 难度:1 相似度:1.25

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157794. （2022•铁路中学•高二下二月）继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展．最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中．请回答：
（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是       ．
（2）在基因工程中，将目的基因与运载体结合时必须用       酶．进行基因转移时，通常要将外源基因转入       中，原因是       ．
（3）通常采用       技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组．
（4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的       细胞中特异表达．
（5）为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠体细胞的       细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体．该技术称为       ．

共享时间:2022-06-16 难度:1 相似度:1.25

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157657. （2022•关山中学•高二下三月）某实验室从马铃薯体内分离出某种酶的编码基因StNCED1，构建了马铃薯块茎特异表达启动子CIPP启动的StNCED1表达载体，最终获得休眠期延长的转基因马铃薯，其实验流程如图所示。请回答下列问题：
$德优题库$
（1）以块茎RNA为起点获取并扩增StNCED1基因的技术称为RT-PCR技术，该过程中需要加入的酶是        ，需要加入的原料是        。
（2）上述实验流程中核心操作的目的是        。
（3）CIPP等启动子的作用是        。
（4）为检测目的基因是否转人马铃薯细胞的染色体DNA上，可采用        技术，以        为探针进行杂交。除该水平之外，还可在        水平上进行鉴定。

共享时间:2022-07-23 难度:1 相似度:1.25

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157088. （2021•西安中学•高三上一月）糖尿病是影响人类健康的重大疾病，利用基因工程结合细胞工程、胚胎工程生产人胰岛素为糖尿病患者带来了福音，请回答下列问题：
（1）将人胰岛素基因与载体结合成重组人胰岛素基因表达载体，此过程需要的酶是        。
（2）大肠杆菌是生产胰岛素常用的工程菌，其优点是        （至少答出两点）；但利用大肠杆菌得到的胰岛素需要进一步加工和修饰才能获得生物活性，原因是        。
（3）转人胰岛素基因牛可通过分泌乳汁来生产人胰岛素。在转入牛受精卵的基因表达载体中，人胰岛素基因的前端必须含有        。将培养到        时期的胚胎进行移植，移植前需要对受体进行        处理，使胚胎能正常着床。若要对胚胎的性别进行鉴定，可在囊胚期取        细胞进行性别鉴定。
（4）若在分子水平上判断获得的转基因牛中人胰岛素基因是否表达，可通过检测        （填物质）进行确定。

共享时间:2021-10-22 难度:1 相似度:1.25

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152828. （2024•师大附中•高二上期末）对微生物或动植物的细胞进行基因改造使他们能够生产药物，是目前基因工程在医药卫生领域的应用。如图表示pBR322质粒和人生长激素基因所在片段的结构信息，将二者构建的重组质粒导入大肠杆菌并进行筛选，最终生产出重组人生长激素。回答下列问题：
$德优题库$
（1）构建重组质粒时应选择的限制酶组合为        ，原因是        ，被切割后的质粒电泳后，可得到        个条带。
（2）使用        可连接目的基因和质粒片段，此过程形成        个磷酸二酯键（只考虑两个DNA片段的连接）。
（3）人生长激素基因在受体菌中是否表达，可检测受体菌中是否含有        （填“人生长激素基因”或“人生长激素基因RNA”或“人生长激素前体物”）；此时的产物        （填“有”或“没有”）生物活性，原因是        。

共享时间:2024-02-09 难度:1 相似度:1.25

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156052. （2023•铁一中学•高二下期中）真核生物基因中通常有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。已知在人体中基因A（有内含子）可以表达出某种特定蛋白（简称蛋白A）。回答下列问题：
（1）某同学从人的基因组文库中获得了基因A，以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A，其原因是        。
（2）若用家蚕作为表达基因A的载体，在噬菌体和昆虫病毒两种载体中，不选用        作为载体，其原因是        。
（3）若要高效地获得蛋白A，可选用大肠杆菌作为受体。因为与家蚕相比，大肠杆菌具有        （答出两点即可）等优点。
（4）若要检测基因A是否翻译出蛋白A，可用的检测物质是        （填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”）。
（5）艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献，也可以说是基因工程的先导，如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示，那么，这一启示是        。

共享时间:2023-05-15 难度:1 相似度:1.25

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156053. （2023•铁一中学•高二下期中）某牧场引进一只产肉性能优异的良种公羊，为了在短时间内获得具有该公羊优良性状的大量后代，该牧场利用胚胎工程技术进行了相关操作。回答下列问题：
（1）为了实现体外受精需要采集良种公羊的精液，精液保存的方法是        。在体外受精前要对精子进行获能处理，精子体外获能可采用化学诱导法，诱导精子获能的药物是        。利用该公羊的精子进行体外受精需要发育到一定时期的卵母细胞，因为卵母细胞达到        时才具备与精子受精的能力。
（2）体外受精获得的受精卵发育成囊胚需要在特定的培养液中进行，该培养液的成分除无机盐、激素、氨基酸、血清外，还含的营养成分有        等。将培养好的良种囊胚保存备用。
（3）请以保存的囊胚和相应数量的非繁殖期受体母羊为材料进行操作，以获得具有该公羊优良性状的后代。主要的操作步骤是        、       、       、       。

共享时间:2023-05-15 难度:1 相似度:1.25

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155249. （2024•西安一中•高三下期中）胆囊收缩素（CCK）是一种能反复作用于大脑皮层海马体诱导其神经元活性的神经递质，胆囊收缩素受体2（CCKR-2）主要表达于大脑的边缘系统，能介导CCK诱导的焦虑相关症状。tTA基因表达的蛋白tTA可以结合到目的基因的启动子上，促进基因的表达。为研究CCK诱导的焦虑症发病机制，研究人员制备了前脑特异性tTA-CCKR-2双转基因小鼠（dtg）模型，主要步骤如下：
（1）第一步：构建转tTA基因鼠和转CCKR-2基因鼠，流程如图所示。图中过程甲是        ；若只考虑导入一个目的基因到染色体上，则T中tTA基因纯合子所占的比例是        ，F₁中含CCKR-2基因的小鼠中纯合子所占的比例是        。
$德优题库$
（2）第二步：构建tTA-CCKR-2双转基因小鼠（dtg）模型。将上述获得的纯合子鼠杂交获得12只小鼠，随后用PCR技术将它们的tTA基因（350bp）和CCKR-2基因（550bp）进行扩增，该技术包括的三个步骤是        ，将扩增产物用电泳检测，结果如图所示，图中        （填数字）为dtg模型鼠。
$德优题库$
（3）第三步：对dtg模型鼠的DNA进行基因测序。该过程所利用的技术是        ，进行该步骤的原因是        。

共享时间:2024-05-19 难度:1 相似度:1.25

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154472. （2021•西安中学•高二上期末）干扰素是用于治疗病毒感染和癌症的免疫活性蛋白质，如图1是构建干扰素工程菌的过程示意图。回答下列问题：
$德优题库$
（1）③过程将B导入大肠杆菌，需用       对大肠杆菌进行处理，使其处于能       的生理状态。
（2）要检测B是否导入大肠杆菌，将③过程后的大肠杆菌先接种于含       的培养基上，然后将在该培养基上生长的大肠杆菌接种在含       的培养基上，在前者培养基上能生长而在后者培养基上不能生长的是导入B的工程菌。
（3）利用图中工程菌不能生产有活性的干扰素，这是因为       。
（4）基因工程在农牧业、工业、环境、能源和医药卫生等方面展示出美好的前景，图2是转基因抗冻番茄培育过程的部分示意图（amp^r为抗氨苄青霉素基因），甲、乙表示相关结构或细胞。PstI酶和SmaI酶切割基因后将产生不同的黏性末端。图中甲代表的是       ，可用       和       提取鱼的抗冻蛋白基因以避免目的基因末端发生任意连接。

共享时间:2021-02-20 难度:1 相似度:1.25

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152905. （2024•西安中学•高二下期末）通过基因工程技术能大量生产人生长激素。图1所示为人工构建的大肠杆菌质粒pBR322，是由三种质粒经复杂重组过程而构建。其上含氨苄青霉素抗性基因（Amp^r ）、四环素抗性基因（Tet^t）。图2为相关限制酶的识别序列和酶切位点。请回答下列问题：
$德优题库$
（1）人工构建pBR322质粒需要的酶有        。
（2）生产生长激素需从人垂体细胞中提取mRNA，逆转录得到DNA，以该DNA为        进行大量复制，获得相应的目的基因。
（3）为了构建重组质粒，采用Pst I、EcoR I处理目的基因和质粒，与只用Pst I处理相比，这样操作的优势是：       。将构建的重组质粒导入大肠杆菌后，为了排除普通大肠杆菌（无pBR322质粒）、空质粒大肠杆菌（含pBR322质粒但没有目的基因）的干扰，进行了进一步检测。配制甲、乙两种培养基，甲培养基含四环素，乙培养基含四环素和氨苄青霉素。含目的基因的大肠杆菌在甲培养基上        （填“能”或“不能”）生存，在乙培养基上
       （填“能”或“不能”）生存。
（4）导入受体细胞后，常用        技术检测生长激素在大肠杆菌中是否成功表达。
（5）基因工程的应用十分广阔，可用转基因牛制作乳腺生物反应器，从乳汁中提取药物，则该操作过程中选择的受体细胞是        ，原因是        。

共享时间:2024-07-03 难度:1 相似度:1.25

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152930. （2024•周至县•高二下期末）和牛是世界公认的高档肉牛品种，其体型较小，肉质鲜嫩，营养丰富。我国科研人员利用胚胎移植技术，按如图所示流程操作，成功地批量培育了和牛这一优良品种。请回答下列问题：
$德优题库$
（1）用        激素处理，可使供体母牛超数排卵，过程①中产生的精子要进行        处理后才具有与卵细胞受精的能力。在实际胚胎工程操作中常以        作为受精的标志。
（2）如图移植的胚胎处于        期。
（3）为提高胚胎利用效率，尽快获得数量较多的子代和牛，使用的技术称为        。

共享时间:2024-07-23 难度:1 相似度:1.25

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dygzswyn

2023-12-11

高中生物 | 高三上 | 解答题

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2023-2024学年陕西省西安市长安一中高三（上）第二次质检生物试卷

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