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156412. (2023•西安一中•高三上一月) 某DNA病毒对动物养殖业危害十分严重。研究人员拟以该病毒抗原蛋白A来制备单克隆抗体,以期快速检测该病毒,其主要技术路线如图所示。
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回答下列问题:
(1)获取基因A:用于制备蛋白A的基因称为        ,获取该基因的常用方法是先建立        ,用一定方法“钓取”相应基因克隆片段后通过        技术扩增,扩增的原料是        
(2)工程菌转化:将工程菌放于低温、低浓度        溶液中,造成细胞膜通透性改变,成为        细胞,通过一定手段将外源DNA导入细胞完成转化。
(3)筛选获得杂交瘤细胞:在杂交瘤细胞筛选中,常使用特殊选择培养基如        培养基,该培养基对               两类细胞的存活和繁殖具有抑制作用。
(4)特定杂交瘤细胞的培养和单克隆抗体的筛选:特定杂交瘤细胞培养常用搅拌式发酵罐,培养时需注意控制如        等条件(写出2点)。发酵罐中营养物质通常需加入葡萄糖、氨基酸、激素、无机盐和        ,以及诱导抗体分泌的化学物质,如丁酸钠。发酵罐内细胞增殖形成        (细胞株/细胞系),其分泌的抗体可利用        技术筛选。罐内上清液中单克隆抗体含少量杂质,可采用        方法纯化。
共享时间:2023-10-11 难度:3
[考点]
单克隆抗体及其应用,基因工程的操作过程综合,DNA片段的扩增与电泳鉴定,
[答案]
1)目的基因    基因文库    PCR    dNTP(四种脱氧核苷三磷酸)
2CaCl2   感受态
3HAT    未融合细胞    同种核融合细胞
4pH、温度、溶解氧    动物血清    细胞系    抗原—抗体杂交    过滤、层析、离心、离子交换、萃取
[解析]
解:(1)分析题意,蛋白A的基因为目的基因,可从基因文库中获取目的基因,因此获取该基因的常用方法是先建立基因文库;PCR是一项体外扩增DNA的技术,常用PCR技术对目的基因进行扩增,dNTP(四种脱氧核苷三磷酸)既能为DNA复制提供能量,又能为PCR技术提供原料。
2)将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法,将工程菌放在低温、低浓度的CaCl2溶液中,使细胞膜的通透性改变,成为感受态细胞,该状态为容易从周围环境中吸收外源DNA的状态,进而可提高转化效率。
3)在杂交瘤细胞筛选过程中,常使用特定的选择培养基(如HAT培养基),该培养基对未融合细胞和同种核融合细胞两类细胞的存活和繁殖具有抑制作用,只有杂交瘤细胞可以正常增殖,因此该选择培养基只允许杂交瘤细胞正常生长,从而筛选出杂交瘤细胞。
4)在发酵过程中,要及时添加必需的营养组分,要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件,因此,特定杂交瘤细胞培养常用搅拌式发酵罐,培养时需注意控制如pH、温度、溶解氧等条件;在动物细胞培养的过程中,通常需加入动物血清、血浆等天然物质;抗原与抗体的结合具有特异性,发酵罐内细胞增殖形成细胞系,其分泌的抗体可利用抗原—抗体杂交筛选;罐内上清液中单克隆抗体含少量杂质,可采用过滤、层析、离心、离子交换、萃取等方法纯化。
故答案为:
1)目的基因     基因文库     PCR     dNTP(四种脱氧核苷三磷酸)
2CaCl2    感受态
3HAT     未融合细胞     同种核融合细胞
4pH、温度、溶解氧     动物血清     细胞系     抗原—抗体杂交     过滤、层析、离心、离子交换、萃取
[点评]
本题考查了"单克隆抗体及其应用,基因工程的操作过程综合,DNA片段的扩增与电泳鉴定,",属于"难典题",熟悉题型是解题的关键。
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152827. (2024•师大附中•高二上期末) 某种转基因油菜的产油率明显高于普通油菜,原因是转入的基因A的表达产物可抑制油菜细胞内糖类和蛋白质的合成,促进丙酮酸大量转化为油脂。如图为科研人员培育产油率高的转基因油菜的主要过程示意图。请回答下列问题:
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(1)获取基因A后可利用        技术对其进行扩增,一个基因A通过该技术进行n次循环,一共需要消耗        对引物。
(2)我国科学家独创的将目的基因导入植物细胞的方法为        。图中将目的基因导入植物细胞的方法为农杆菌转化法,转化是指        
(3)过程①中,通常将基因A插入到Ti质粒T-DNA中的        之间,以利于基因A的表达。过程④中,需要添加的具有启动细胞分裂、再分化作用的关键激素为        。经图示过程获得的油菜是否为产油率高的转基因油菜,还需要对其进行        的鉴定,该种鉴定方法属于个体生物学水平的鉴定,只有符合要求并通过安全性测试的转基因油菜才能推广并种植。
共享时间:2024-02-09 难度:1 相似度:1.33
155249. (2024•西安一中•高三下期中) 胆囊收缩素(CCK)是一种能反复作用于大脑皮层海马体诱导其神经元活性的神经递质,胆囊收缩素受体2(CCKR-2)主要表达于大脑的边缘系统,能介导CCK诱导的焦虑相关症状。tTA基因表达的蛋白tTA可以结合到目的基因的启动子上,促进基因的表达。为研究CCK诱导的焦虑症发病机制,研究人员制备了前脑特异性tTA-CCKR-2双转基因小鼠(dtg)模型,主要步骤如下:
(1)第一步:构建转tTA基因鼠和转CCKR-2基因鼠,流程如图所示。图中过程甲是        ;若只考虑导入一个目的基因到染色体上,则T中tTA基因纯合子所占的比例是        ,F1中含CCKR-2基因的小鼠中纯合子所占的比例是        
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(2)第二步:构建tTA-CCKR-2双转基因小鼠(dtg)模型。将上述获得的纯合子鼠杂交获得12只小鼠,随后用PCR技术将它们的tTA基因(350bp)和CCKR-2基因(550bp)进行扩增,该技术包括的三个步骤是        ,将扩增产物用电泳检测,结果如图所示,图中        (填数字)为dtg模型鼠。
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(3)第三步:对dtg模型鼠的DNA进行基因测序。该过程所利用的技术是        ,进行该步骤的原因是        
共享时间:2024-05-19 难度:1 相似度:1.33
183511. (2017•西安八十三中•二模) 家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力.将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可提取干扰素用于制药.
(1)进行转基因操作前,需用       酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞.
(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入载体质粒的启动子和       之间.
(3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞.改PCR反应体系的主要成分应该包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水,4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、引物 和       
(4)将目的基因导入动物细胞最常用的方法是       .此方法的受体细胞多是       
(5)将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养时需要提供气体环境:95%空气+5%CO2
O2       所必需的,CO2的主要作用       ;培养液应进行无菌处理.通常还要在培养液中添加一定量的       ,以防培养过程中的杂菌污染.此外,应定期更换培养液,防止代谢产物积累对细胞自身造成危害.
共享时间:2017-03-27 难度:1 相似度:1.33
157794. (2022•铁路中学•高二下二月) 继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后,膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展.最近,科学家培育出一种转基因小鼠,其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中.请回答:
(1)将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞,常用方法是       
(2)在基因工程中,将目的基因与运载体结合时必须用       酶.进行基因转移时,通常要将外源基因转入       中,原因是       
(3)通常采用       技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组.
(4)在研制膀胱生物反应器时,应使外源基因在小鼠的       细胞中特异表达.
(5)为使外源基因在后代长期保持,可将转基因小鼠体细胞的       细胞中构成重组细胞,使其发育成与供体具有相同性状的个体.该技术称为       
共享时间:2022-06-16 难度:1 相似度:1.33
157793. (2022•铁路中学•高二下二月) 类风湿性关节炎(RA)是一种自身免疫病,致残性强。研究表明,该病的病理改变与肿瘤坏死因子-α(TNF-a)密切相关,而一种人鼠嵌合的抗TNF-a单克隆抗体能有效治疗RA.如图为该单克隆抗体制备过程示意图。
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(1)       技术是单克隆抗体技术的基础,该过程中需要的气体条件是       
(2)图中的抗原A是       ,常用的促融剂是       。图中“(  )和抗体检测”,括号内应填       
(3)细胞融合完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有       。体系中出现多种类型细胞的原因是       
(4)单克隆抗体主要的用途有:       (至少答出两点)。
共享时间:2022-06-16 难度:1 相似度:1.33
157657. (2022•关山中学•高二下三月) 某实验室从马铃薯体内分离出某种酶的编码基因StNCED1,构建了马铃薯块茎特异表达启动子CIPP启动的StNCED1表达载体,最终获得休眠期延长的转基因马铃薯,其实验流程如图所示。请回答下列问题:
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(1)以块茎RNA为起点获取并扩增StNCED1基因的技术称为RT-PCR技术,该过程中需要加入的酶是        ,需要加入的原料是        
(2)上述实验流程中核心操作的目的是        
(3)CIPP等启动子的作用是        
(4)为检测目的基因是否转人马铃薯细胞的染色体DNA上,可采用        技术,以        为探针进行杂交。除该水平之外,还可在        水平上进行鉴定。
共享时间:2022-07-23 难度:1 相似度:1.33
157655. (2022•关山中学•高二下三月) 甘草酸是中药甘草中的主要活性成分。为了快速检测到甘草酸,科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体,其基本操作过程如图。回答下列问题:
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(1)对小鼠注射甘草酸一牛血清白蛋白结合抗原的目的是       ,细胞甲需要与骨髓瘤细胞结合的原因是        
(2)细胞甲和骨髓瘤细胞的融合需要诱导,除了可以用聚乙二醇诱导外,还可以用        诱导。如果只考虑两个细胞的融合,则细胞乙有        种类型。
(3)过程③的目的是        ,过程④的目的是        。获得细胞丁后,培养的方式有:注射到        进行培养,或者        
共享时间:2022-07-23 难度:1 相似度:1.33
156590. (2023•雁塔二中•高二上二月) “生物导弹”是一种疗效高、毒副作用小的新型药物。如图是制备“生物导弹”的示意图,据图回答:
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(1)“生物导弹”借助        的导向作用,能将药物定向带到癌细胞所在位置,在原位杀死癌细胞。
(2)在进行过程①之前,需要向小鼠注射        ,使小鼠产生免疫反应。与诱导植物原生质体融合的方法不同的是,过程①还可采用        
(3)过程②用特定的        对融合细胞进行筛选,得到杂交瘤细胞。杂交瘤细胞的特点是        。过程③还需进行克隆化培养和        检测。
(4)单克隆抗体最主要的优点是        ,并可大量制备。
共享时间:2023-12-25 难度:1 相似度:1.33
156052. (2023•铁一中学•高二下期中) 真核生物基因中通常有内含子,而原核生物基因中没有,原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。已知在人体中基因A(有内含子)可以表达出某种特定蛋白(简称蛋白A)。回答下列问题:
(1)某同学从人的基因组文库中获得了基因A,以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A,其原因是        
(2)若用家蚕作为表达基因A的载体,在噬菌体和昆虫病毒两种载体中,不选用        作为载体,其原因是        
(3)若要高效地获得蛋白A,可选用大肠杆菌作为受体。因为与家蚕相比,大肠杆菌具有        (答出两点即可)等优点。
(4)若要检测基因A是否翻译出蛋白A,可用的检测物质是        (填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”)。
(5)艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献,也可以说是基因工程的先导,如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示,那么,这一启示是        
共享时间:2023-05-15 难度:1 相似度:1.33
155727. (2024•西安市蓝田县城关中学•高二下期中) 为使水稻获得抗除草剂性状,科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入水稻植株,获得抗草甘膦转基因水稻。
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(1)将草甘膦抗性基因作为       ,与Ti质粒用相同的       和DNA连接酶处理构建基因表达载体。
(2)用       处理农杆菌后获得感受态细胞,将其与基因表达载体混合完成转化后,在添加       的培养基中,经筛选1得到含基因表达载体的农杆菌。
(3)利用PCR技术,可以鉴定被侵染的愈伤组织中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下:
5'---ATGGCT………AGGAAC---3'
3'---TACCGA………TCCTTG---5'
根据上述序列应选择引物       (填字母)进行PCR。
A.引物:5'-TACCGA-3'
B.引物:5'-GTTCCT-3'
C.引物:5'-AUGGCU-3'
D.引物:5'-ATGGCT-3'
(4)PCR扩增时需要根据草甘膦抗性基因序列设计       种引物,其原因是       
(5)除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外,还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2,以确定目的基因是否       。两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过细胞的       过程,获得转基因水稻。
共享时间:2024-05-15 难度:1 相似度:1.33
155726. (2024•西安市蓝田县城关中学•高二下期中) 如图是生产抗β干扰素单克隆抗体的过程,回答相关问题。
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(1)与传统方法生成的抗体相比,单克隆抗体最主要的优点是        。在癌症治疗时,把抗癌细胞的单克隆抗体跟抗癌药物相结合制成的生物导弹,能借助单克隆抗体的        作用,将药物带到癌细胞所在位置,将其在原位杀死。
(2)过程①中,将        溶液注射给小鼠,再从小鼠脾脏中分离B淋巴细胞。实验小鼠若无胸腺,则对实验结果        (填“有”或“没有”)影响。实验中所需的骨髓瘤细胞具有        的特性。
(3)过程②中,B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合,加入        促进细胞融合,此过程体现的细胞膜结构特点是        
(4)过程④中,对杂交瘤细胞进行               检测,经多次筛选,就可获得能分泌抗β干扰素单克隆抗体的细胞。
(5)将杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养,从        中获取单克隆抗体,该抗体可特异性结合的抗原是        
共享时间:2024-05-15 难度:1 相似度:1.33
152828. (2024•师大附中•高二上期末) 对微生物或动植物的细胞进行基因改造使他们能够生产药物,是目前基因工程在医药卫生领域的应用。如图表示pBR322质粒和人生长激素基因所在片段的结构信息,将二者构建的重组质粒导入大肠杆菌并进行筛选,最终生产出重组人生长激素。回答下列问题:
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(1)构建重组质粒时应选择的限制酶组合为        ,原因是        ,被切割后的质粒电泳后,可得到        个条带。
(2)使用        可连接目的基因和质粒片段,此过程形成        个磷酸二酯键(只考虑两个DNA片段的连接)。
(3)人生长激素基因在受体菌中是否表达,可检测受体菌中是否含有        (填“人生长激素基因”或“人生长激素基因RNA”或“人生长激素前体物”);此时的产物        (填“有”或“没有”)生物活性,原因是        
共享时间:2024-02-09 难度:1 相似度:1.33
155684. (2024•田家炳中学•高二下期中) 靶向药物是指被赋予了靶向能力的药物或制剂,其目的是使药物或其载体能瞄准特定的病变部位,并在目标部位蓄积或释放有效成分。“生物导弹”就是主动靶向药物的一种,其疗效高、毒副作用小,具有广阔的应用前景。
(1)“生物导弹”可以把抗癌细胞的单克隆抗体跟               或细胞毒素相结合,借助单克隆抗体的导向作用,将药物定向带到癌细胞所在的位置,在原位杀死癌细胞。
(2)如图是制备单克隆抗体的途径模式图,据图回答问题:
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通过过程①       技术,可以得到多种杂交细胞,再通过③过程用特定的        筛选出杂交瘤细胞,对上述筛选出的杂交瘤细胞还需要先后多次进行               ,才能获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。
(3)与传统方法生产的抗体相比,单克隆抗体最主要的优点是         
共享时间:2024-05-14 难度:1 相似度:1.33
155685. (2024•田家炳中学•高二下期中) 如图是生产抗β干扰素单克隆抗体的过程,回答相关问题。
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(1)与传统方法生成的抗体相比,单克隆抗体最主要的优点是        。在癌症治疗时,把抗癌细胞的单克隆抗体跟抗癌药物相结合制成的生物导弹,能借助单克隆抗体的        作用,将药物带到癌细胞所在位置,将其在原位杀死。
(2)过程①中,将        溶液注射给小鼠,再从小鼠脾脏中分离B淋巴细胞。实验小鼠若无胸腺,则对实验结果        (填“有”或“没有”)影响。实验中所需的骨髓瘤细胞具有        的特性。
(3)过程②中,B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合,加入        促进细胞融合,此过程体现的细胞膜结构特点是        
(4)过程④中,对杂交瘤细胞进行               检测,经多次筛选,就可获得能分泌抗β干扰素单克隆抗体的细胞。
(5)将杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养,从        中获取单克隆抗体,该抗体可特异性结合的抗原是        
共享时间:2024-05-14 难度:1 相似度:1.33
154472. (2021•西安中学•高二上期末) 干扰素是用于治疗病毒感染和癌症的免疫活性蛋白质,如图1是构建干扰素工程菌的过程示意图。回答下列问题:
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(1)③过程将B导入大肠杆菌,需用       对大肠杆菌进行处理,使其处于能       的生理状态。
(2)要检测B是否导入大肠杆菌,将③过程后的大肠杆菌先接种于含       的培养基上,然后将在该培养基上生长的大肠杆菌接种在含       的培养基上,在前者培养基上能生长而在后者培养基上不能生长的是导入B的工程菌。
(3)利用图中工程菌不能生产有活性的干扰素,这是因为       
(4)基因工程在农牧业、工业、环境、能源和医药卫生等方面展示出美好的前景,图2是转基因抗冻番茄培育过程的部分示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因),甲、乙表示相关结构或细胞。PstI酶和SmaI酶切割基因后将产生不同的黏性末端。图中甲代表的是       ,可用              提取鱼的抗冻蛋白基因以避免目的基因末端发生任意连接。
共享时间:2021-02-20 难度:1 相似度:1.33

dygzswyn

2023-10-11

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